近年来,随着小龙虾养殖规模的急速扩张,小龙虾主产区大规模暴发性死亡给养殖户造成了巨大的损失。中国水产科学研究院水产病害防治学科首席科学家曾令兵博士2015年对不同地区病虾所做检测均发现虾体大量携带白斑病毒,然而在天然封闭水体中抽检的小龙虾未发现病毒,基本确定小龙虾发病是病毒感染并发细菌性疾病造成的。2016年华中农业大学顾泽茂教授在不同时段分别对小龙虾活体进行检测,在5-7月份发现大量病虾携带白斑病毒及柠檬酸杆菌。笔者结合生产实践总结,认为造成小龙虾大量死亡的根本原因是白斑病毒感染引起的一系列死亡现象。
白斑病毒主要对虾体的造血组织、结缔组织、前后肠的上皮组织、血细胞、鳃等系统进行破坏。发病初期病虾活力差,白天不怕光在池塘边缓慢爬行,或进入地笼即出现死亡;尾部肌肉白浊,先死大虾,后死中虾、小虾,头胸甲与腹节甲壳易被掀开而不粘连真皮,内脏积水严重。
【病原】
白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)是线头病毒科(Nimaviridae)、白斑病毒属(Whispovirus)的唯一成员。WSSV为有囊膜的杆状病毒,呈卵圆形或椭圆形,直径120~150纳米,长270~290纳米,双链DAN病毒。
【主要症状】
病虾活力低下,螯足及附肢无力,无法支撑身体,大多分布于养殖池塘边浅水区;头胸甲易剥离,部分头胸甲处有黄白色斑点(图3、4);解剖可见肝胰腺颜色淡黄,胃肠道无食物,一些病虾有黑鳃症状;部分尾部肌肉发红或者呈现白浊样。
【流行情况】
世界上所有人工养殖的南美白对虾及克氏原螯虾均是WSSV的宿主,大部分蟹类也对WSSV敏感。该病毒可通过水平传播与垂直传播感染对虾,台风或梅雨季节引起气温剧烈下降常引起该病暴发。患病的小龙虾最大的特点是先死大虾,后死中虾,再死小虾,且发病快、传染性强、死亡率高。
据丁正峰等对江苏省的邵伯湖、白马湖、盱眙、禄口等地的调查,5-7月份养殖的小龙虾体内均能检测到该病毒,WSSV检出率为30%~52%,死亡率约为30%~50%。
小龙虾WSSV发病快,传染性强可能与患病死亡的小龙虾被其他未患病的虾残食有关,通过食物链或自相残食进入宿主消化道是WSSV的主要感染或传播途径。且该病常并发感染细菌性疾病,而使死亡量增加。
【防治方法】
1、提早投苗,提早收获,待疾病暴发时大虾基本收获完毕。
2、养殖池塘种好水草,改善水质,保持水质稳定,注重水体增氧。
3、稳定水体缓冲能力,提高水体总碱度、硬度。
4、在4月底至5月底适时投喂抗病毒中草药如“三黄散”或“酵母多糖”,以提高小龙虾非特异性免疫力和抗病力,能大大降低发病率。
5、对于发病小龙虾养殖池塘可选择第一天全池泼洒“二氧化氯”,第二天全池泼洒“聚维酮碘溶液”或“季铵盐络合碘”,第三天全池泼洒“大黄末”;外用药物时同时口服“三黄散”和“水产复合多维”5~7天,并发细菌性疾病时口服“5%恩诺沙星粉”3~5天。
【注意事项】
1、确诊患病毒病时不得使用强刺激性药物如强氯精、漂白粉、生石灰等。
2、饲养活动应以避免小龙虾产生应激为原则。
【实践总结】
小龙虾白斑病毒其实并不可怕,没有在南美白对虾养殖上那么高的死亡率,通过外部环境调控和内服抗病毒用药能取得非常好的防治效果。
一、预防:
(一)生产预防:
1.所有养殖操作要参照相关养殖标准,并符合卫生防疫操作规范;
2.及时捞出病死小龙虾,无公害处理死亡小龙虾,采用深埋、焚烧、集中高浓度药物消毒处理等方法均可,可以防止该病的继续传播。
3.改善水质环境,可适当施用一些微生态制剂;保持适当水量和水体稳定,不要频繁换水,防止高温,可以提高小龙虾的抗应激能力或抗病力;在必要换水时,切忌将患病虾池水未经消毒排入进水渠,在加注新水时要避免将病原已经污染的沟渠水引入池塘,并避免剧烈冲刷池底,以免将底质污泥冲起。
4.对患病池水体、接触疫病水体的工具、器皿、人员需要消毒杀菌处理,切断病原传播途径。
5.适当降低放养密度,及时捕捞成虾上市,在捕捞过程中,尽量小心操作减少人为干扰,避免引起小龙虾应激反应。
(二)药物预防:
1.外用药:泼洒聚维酮碘或季氨盐络合碘,每10天泼洒一次,可交替使用,剂量按商品药物上的说明书(0.3-0.5ml/每立方水体)。
2.免疫促进剂预防:对于没有发病的小龙虾,饲料中添加免疫促进剂进行预防,如β-葡聚糖、壳聚糖、多种维生素等(使用剂量参考商品药物的说明书,投喂时间:每15天可以连续投喂4-6天),可提高小龙虾的抗病力。
3.内服药物:每15天可以用中草药(如板蓝根、大黄、鱼腥草混合制剂,等比例分配药量)进行预防。中药需要煮水拌饲料投喂,使用剂量为每公斤虾体重0.6-0.8克,连续投喂4-5天。如果事先将中草药粉碎混匀,在临用前用开水浸泡20-30分钟,然后连同药物粉末一起拌饲料投喂则效果更佳。
二、治疗:
(一)外用药物
1.池塘消毒可以采用杀灭细菌和病毒相结合的方法进行,以碘制剂最为理想,如聚维酮碘、季氨盐络合碘等,二者可交替使用。使用方法是连续泼洒2-3次,间隔一天泼洒一次。使用剂量参考商品药物说明书上的剂量((0.5ml/每立方水体)),注意选择质量可靠厂家信誉好的碘制剂产品和生产日期(建议选出三个月以内的产品)。
(二)内服药物
2.内服药物:对于发病池而尚有小龙虾摄食时,可以采用口服途径投喂抗病毒和抗细菌中草药进行综合治疗(天然植物抗病毒复方制剂,每公斤虾体重1.0克)。临用前用开水浸泡20-30分钟,连用4-5天即可。建议在小龙虾预防和治疗疾病时投喂对虾精饲料,并用尼龙网做成饲料台进行投喂,以便观察虾摄食情况。
江苏省苏州市吴中区一小龙虾、河蟹混养池塘,面积3亩,水深1.3米,无增氧机,平底塘(见图1)。2015年元旦后,用五氯酚钠杀野杂鱼,1月中旬种植伊乐藻,2月底一次性放规格55头/斤的蟹苗70斤。池塘未彻底清塘,塘中有小龙虾,数量不详。3月份开始投喂配合饲料和玉米,4月中旬开始喂冰鲜鱼。进入6月份,塘中小龙虾大量繁殖,密度增大,龙虾夹草,导致草烂,草烂之后,小龙虾开始出现死亡,一开始每天死亡几只、十几只,6月中旬,死亡量增多,每天死亡10斤左右,6月20号河蟹出现死亡,但死亡量不大,总共就几只死亡。在小龙虾出现死亡后,养殖户停止喂鱼,只投喂配合饲料和玉米。
2015年6月24日下午到池塘检查,塘中漂浮着少量死龙虾,测定水温26℃,pH值9.1,氨氮、亚硝酸盐测不出。用网兜从池塘边的防逃网上取4只发病的小龙虾(见图2),主要症状为病虾无力,头胸甲易剥离。分别从4尾虾的肝胰腺中接种进行细菌分离培养,并取鳃和肝胰腺用95%酒精固定,进行白斑症病毒(WSSV)、螺原体(Spiroplasma)、类立克次氏体(RLO)检测。
结果:经28℃培养24h,其中3只虾分离出少量细菌(见图3),分离菌经16SrDNA测序鉴定为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii),药敏试验结果显示,分离菌对“鳃皮肠利康”、“出败康”、“肠苷康”敏感(见图4)。经PCR检测,4只小龙虾白斑症病毒(WSSV)均呈阳性,螺原体(Spiroplasma)和类立克次氏体(RLO)均呈阴性(见图5)。
分析:1、每年6月份是华中地区小龙虾(克氏原螯虾)发病高峰期,死亡量大,按照细菌病处理效果不明显,根据头胸甲易剥离的症状和病毒检测结果,以及相关资料报道(王忠发2007,薛晖2010)初步确诊是白斑症病毒(WSSV)感染引起的发病。
2、本病例中发病小龙虾体内同时分离到弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii),李华等(2001)确定该菌是河蟹的致病菌,本病例分离的该菌是否是继发感染、对小龙虾是否产生危害还有待进一步观察。
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