为了研究牛奶的保藏温度与细菌的变化规律,笔者将鲜牛奶、煮沸牛奶和市售消毒牛奶保存于室温及4～8℃冰箱条件下,对其进行细菌总数、大肠菌群最可能值(MPN)及pH值的测定.下面一起来了解一下：牛奶的保藏温度与细菌变化规律的结果与分析。
结果表明，以市售消毒牛奶保存时间最长（4～8℃冰箱中72～96h，室温下36～18h）；煮沸牛奶次之（4～8℃冰箱中／18～72h，室温下18～2／1h）；鲜牛奶最短（4～8℃冰箱中2／1～36h，室温6～9h）。
随着社会的进步和生活水平的不断提高，牛奶及乳制品已逐渐成为人类生活的基本需要。“一杯牛奶，强壮一个民族”，即是牛奶及乳制品营养作用在人类生活中地位的最好体现。同时正是凶为牛奶及乳制品营养丰富、配比合理，使之成为各种微生物生长的良好基质。微生物在牛奶及乳制品中生长发育，既有可能改善这些食品的质量，也可造成其腐败变质，甚至可能传播某些疾病，对人类的健康造成危害。因此，牛奶及乳制品在生产过程中，尤需注意微生物的变化情况及其保藏温度，防止其变质。为了探讨鲜牛奶、煮沸牛奶及市售消毒牛奶在不同保存温度下细菌总数、大肠菌群最可能值(MPN)及pH的变化规律，进行了本项研究。现报告如下。
1、材料和方法
1.1鲜牛奶的采集与处理
鲜牛奶来源于动物科学系基地的牛场。2016年2月20日下午2点挤乳，先挤去前部分的乳汁，采集后部分的乳汁，混匀过滤，分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，带回实验室。分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.2煮沸牛奶的采集与处理
来源于动物科学系基地的牛场。把刚挤回的鲜牛奶加热到沸腾，分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.3市售消毒牛奶的采集与处理
由超市购得某奶牛公司生产的消毒软包装牛奶，其配料为鲜牛奶和白砂糖，经巴氏杀菌法消毒，生产日期为2016年2月20日。带回实验室后分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.4细菌总数的测定
先将待检的乳样摇匀，用灭菌生理盐水按10倍递增法进行稀释。鲜牛奶选择10-5和10-6两个稀释度，煮沸牛奶选择10-2和10-8两个稀释度，消毒牛奶选择10-2和10-3两个稀释度。各取1mL上述稀释度的乳样于90mm平皿中，每个稀释度作了2个平皿，稀释液移人平皿后，即时将凉至45℃的营养琼脂培养基倾注入平皿内约15mL，并轻轻转动使其均匀，待琼脂凝固后，倒置于37℃温箱中培养48h，取出，计算菌落数，并求得两组的平均数，最后换算成活细菌总数(个／m6。
1.5MPN的测定
1.5.1
MPN的测定程序（见图1）
1.5.2培养基的制备
乳糖胆盐发酵管（单料）、伊红美蓝琼脂平板、乳糖发酵管等按常规方法制备。
1.5.3乳样处理
鲜牛奶取10-1、10-2、10-3三个稀释度进行MPN试验，煮沸牛奶及市售消毒牛奶取原液、10-1、10-2三个稀释度进行MPN试验。
1.5．4结果判定
根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，并依据表内所查得的数值报告每100mL大肠菌群的最可能值。
1.6酸度的测定
通过pH值的高低来反映，摇匀后可直接取样，用pH试纸测定。
1.7试验设计
1.7.1鲜牛奶
将其保存于室温和1～8℃冰箱中，于O、3、6、9、12、18、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
1.7.2煮沸牛奶
将其保存于室温和4～8℃冰箱中，于O、6、12、18、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
1.7.3市售消毒牛奶
将其保存于室温和_～8℃冰箱中，于O、12、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
2.、结果与分析
2..1鲜牛奶
鲜牛奶的细菌总数、MPN及酸度测定结果详见表1。
国家标准规定：生牛乳中每毫升的细菌总数≤106个，每100mL的MPN≤500个，pH值的正常范围是6.5～6.7。
由表1可见，鲜牛奶在室温下保存6～9h后就变质；而在4～8℃冰箱中，可保存2／1～36h。
2..2煮沸牛奶
煮沸牛奶的细菌总数、MPN、及酸度测定结果详见表2。
国家标准规定：煮沸可直接饮用的鲜牛奶每毫升的细菌总数≤3×101个，每100mL的MPN≤90个，pH值的正常范围是6.5～6.7。
由表2可见，煮沸牛奶在室温下保存18～24h后就开始变质，而在4～8℃冰箱中则可保存／18～72h。2.3市售消毒牛奶
市售消毒牛奶的细菌总数、MPN及酸度测定结果详见表3。
国家标准规定：消毒牛奶中每毫升的细菌总数≤3×101个，每100mL的MPN≤90个，pH值的正常范围：6.5～6.7。
由表3可见，市售消毒牛奶在室温下可保存36～／18h，而在4～8℃冰箱中则可保存72～96h。3小结与讨论
本试验对鲜牛奶、煮沸牛奶和市售消毒牛奶等三种不同的奶样进行研究。结果表明，市售消毒牛奶无论在室温还是在4～8℃冰箱中，其保存时间均是最长，这与其软包装的特点和要求有关。
新挤出来鲜牛奶一般含菌数较少，但受不同挤乳用具、容器、牛体及牛舍空气等不同程度的污染，凶此混合乳中细菌数变化很大。本次试验的鲜牛奶来源于动物科学系基地的牛场，挤乳前先用温水刷洗乳房，挤乳桶清洗的干净，牛舍环境较好，故该牛场出售的鲜牛奶污染较小，细菌总数(1×105个／ml.)、MPN3)及pH值均符合国家标准。
鲜牛奶在室温下保存，从O～6h这一时期，细菌总数有着较慢的增长。刚挤ILIJ的鲜乳存在细菌抑制物质，在一定时期内细菌数增长慢；而到了9h时，鲜牛奶中的细菌便迅速增殖，细菌总数已超过国家标准，鲜牛奶开始变质。在一定时期内，室温下保存的鲜牛奶的MPN逐渐增大，到了12h时达到了繁殖高峰期（140个/100mL）；从18h开始到168h，MPN又慢慢减少；鲜牛奶的酸度，在O～6h内，pH值均≥6.5，属于正常范围，从9h开始，pH值下降，酸度升高，而当pH值下降到一定程度又开始慢慢回升，这是凶为在乳的真菌期，乳中酸性环境被中和，乳由酸性变为中性或弱碱性。
煮沸牛奶是把刚挤ILIJ来的鲜牛奶加热到沸腾，而市售消毒牛奶经过了巴氏消毒，热敏感菌被杀死，故细菌总数显著减少，保存期延长。市售消毒奶的MPN-直是小于3个／100mL，这是凶为经过巴氏消毒后，大肠菌群全部死亡。
本试验仅选用了两个不同的保藏温度（室温和4～8℃冰箱）。保存于室温中，温度适宜，有利于各种细菌的繁殖；保存于4～8℃冰箱中，适于室温下繁殖的细菌被抑制或生长缓慢，而嗜冷菌数量又非常少，故鲜奶腐败变质的速度比较缓慢，保存期长于室温。试验结果也充分证明了这一点。
综上所述，保藏温度对细菌生长的影响很大，而保藏前的处理也很重要。延长保存时间，防止牛奶变质，最佳的方法就是先把刚挤回来的鲜牛奶热处理，冉进行消毒杀菌，尽可能减少所含细菌数，并在最快的时间内放置于4～8℃冰箱中保藏。
相关知识
土元饲养的温度与温度
饲养的密度与温度：
饲养密度每平方米需种卵0．35kg(出虫率70％-80％)，当其生长到4-5龄时，可利用虫体温度来控制饲养室温度(饲养室可按照立体恒温方法建造)一般O℃为冬眠期，不需加温；0-25℃为不宜生长期；25-32~C为最宜生长期；40℃以上为死亡期。
温、湿度控制：
土元形体为椭圆形，体表面积大，体内水分散发较快。温度20℃以下蜕壳生长较慢，超过38℃停止生长，烦躁不安，多在饲养土表面爬行。所以人工饲养土元在温度湿度控制上应适应其需求，达到最佳养殖效果。人工控制湿度也防止忽高忽低。其中土元各龄段对湿度要求也有区别。孵化卵块为28℃－30℃，幼虫中虫为28℃－32℃，成虫为25℃－28℃。人工控制湿度在各阶段也不同。孵卵时为35%－40%，幼虫为35%，中虫为40%，成虫为45%。野生的土元多生长在阴暗潮湿的环境中，怕阳光直射。人工饲养给它创造这一最佳生长条件并不难。门窗用麻袋或深色蛇皮袋挡住，坑房内湿度走失较慢。在加温养殖时，饲养土湿度走失较快，可用无农药污染的专用喷雾器在饲养土表面及坑池墙壁上喷水，要求喷雾均匀，少量多次。
成虫期间饲养土湿度要大一些(40%－45%)，可以在饲养土表面喷水或增加青饲料的投喂量。筛制块后在空坑池里放水增湿。经4个月产卵后，母土元体重明显减轻，大批量死亡。这时便可采收成品虫了。在采收前3个月第二批幼虫已孵化好并等着分池，这样饲养池始终不空置，周而复始，以达到最佳效益。
青海省湟源县鸡新城疫免疫抗体监测结果与分析
鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、热性、败血性、烈性传染病,我国采取以疫苗免疫为主的综合防控措施,有效控制了该病在国内的大规模流行,但新城疫疫苗免疫失败现象仍时有发生。雏鸡体内母源抗体水平是不同的,统一接种新城疫免疫疫苗后,对接种疫苗可产生不同程度的干扰因素.尤其雏鸡母源抗体水平偏高时,将严重干扰免疫接种的抗体效力,使其发挥不出应有的免疫作用,导致整个鸡免疫水平参差不齐。青海省湟源县鸡新城疫免疫抗体监测结果与分析，一起来了解一下！
1、材料与方法
1.1血清样品来源
于2014-2016年期间共采集湟源县鸡新城疫疫苗免疫后的血清样品3242份。
1.2试剂和仪器
鸡新城疫血凝抑制抗原、阳性血清、阴性血清购自青岛易邦生物工程有限公司；114小型台式离心机为SIGMA公司产品；量程为5-50μL可调八道移液器为Thermo公司产品；ZW-A型微量振荡器为常州华冠仪器有限公司产品；一次性96孔“V型”微量反应板为南通市卫宁实验器材有限公司产品。
1.3血清样品的制备
利用一次性1．omL注射器从免疫鸡的翅静脉处采集血液0.5-0.8mL，将其全部打入1.5mL离心管中，将离心管依次置于37℃温箱th，2-8℃冰箱2h后，3000r／min离心10min，小心吸取上清液存入另一个1.5mL离心管中，即得血清样品，20℃保存备用。
1.4血凝抑制试验（HI）操作方法与判定标准
1.4.11%鸡红细胞悬液的制备
在一次性5.0mL注射器中吸入2．omL抗凝剂后，于健康公鸡翅静脉处采集血液2．OmL，分别采集3只公鸡，将3只鸡抗凝血液全部置于50mL离心管中，加入10倍体积的o．Olmol／L、pH7.2的灭菌PBS，混合均匀，2000r／min离心10min，小心吸取上清液舍弃，下层红细胞用40.omL灭菌PBS重悬，2000r／min离心10min，上清液舍弃，利用灭菌PBS将下层红细胞配制成1%鸡红细胞悬液，4℃保存备用，于配置当天用完。
1.4.24个血凝单位抗原的制备
在96孔微量板的各孔加入25μL灭菌PBS，取25μL鸡新城疫血凝抑制抗原加入第1孔内，混匀后吸取25μL至第2孔，依次倍比稀释至第11孔，各孔分别加入25μLl%鸡红细胞悬液，微量振荡器上摇匀，室温静置30min后观察结果，红细胞完全凝集的最高稀释度即为抗原的血凝效价。将抗原的血凝效价除以4即得4单位抗原的稀释倍数，利用灭菌PBS配置4单位抗原。
1.4.3抗体效价的测定
在96孔微量板的各孔加入25μL灭菌PBS，取25μL血清样品加入第1孔内，混匀后吸取25μL至第2孔，依次倍比稀释至第10孔，1-11各孔分别加入25μL4单位抗原，微量振荡器上摇匀，室温静置30min。各孔分别加入25μL1%鸡红细胞悬液，微量振荡器上摇匀，室温静置30min后观察结果，完全抑制4单位抗原凝集的血清最高稀释度即为检测样品的HI抗体效价(log2)，当血清样品HI抗体效价≥4log2判为阳性，＜4log2判为阴性。
2、结果与分析
2..1不同年份的检测结果
如表1所示，共检出阳性样品2966份，平均免疫合格率为91.49%(2966j3242)，其中2014年、2015年、2016年免疫合格率分别为88.25%(976j1106)、92.07%(940／1021)、94.17%(1050／1115)，免疫合格率自2014-2016年呈现出逐步升高的趋势。
3、讨论
疫苗免疫后抗体水平检测可有效判断疫苗的免疫效果，本次新城疫免疫效果监测覆盖了湟源县2014-2016最近3年的时间跨度，并且分别从养殖场和散养户进行抽样检测，监测结果能够较好的反映出目前湟源县新城疫疫苗的免疫效果。本次调查平均免疫合格率为91.49%，远远超过了农业部规定的免疫合格率在70%以上的标准。与国内其他地区相比，也远远高于甘肃宁县2015年平均为76.31%免疫合格率，略高于福建浦城县2015年总体为91.287%的免疫合格率。表明湟源县已全面开展鸡新城疫的免疫工作，疫苗免疫程序比较合理，疫苗免疫效果较好。但本次调查中发现湟源县规模养殖场的平均免疫合格率较散养户高出8.07个百分点，究其原因可能为：①在防控意识上，规模场的防控意识更强，投入了大量的人力财力，而散养户的防控意识较淡薄，少免、漏免等情况时有发生；②在技术水平上，养殖场有兽医专职人员负责防疫，技术水平较高，且经常进行抗体检测，能准确把握免疫时机，而散养户做不到抗体的实时监测，无法掌握免疫前的抗体水平，往往盲目免疫；③在养殖环境上，规模场的饲养管理与环境卫生均明显好于散养户，鸡群的免疫力和抗病力较好，可有效降低免疫失败。故对散养户定期组织培训，提高其防疫意识和技术水平，逐步引导其向规模场方向发展已十分棘手和必要。
牛奶果怎么吃？牛奶果的功效与作用有哪些？
牛奶果原是一种野生植物，近年开发成为一种既有观赏价值又有保健功能的小杂果。牛奶果是一种很奇特的水果，它流出来的汁液是牛奶汁，是一种国外进口水果，而且十分美味，不过因为是不常见的水果，很多人对于这种水果的吃法不是很清楚，下面我们就一起来了解一下牛奶果怎么吃？牛奶果的功效与作用有哪些？
牛奶果多少钱一斤
牛奶果价格在二十块钱左右一斤。
牛奶果的功效与作用
牛奶果奇特之处还在于：无论切开叶片、果实、枝条,均可溢出牛奶一样的白色乳汁，这也就是“牛奶果”名称的由来。牛奶果有很强的适应性，不择土壤，喜光耐半阴，耐寒，可需耐-15℃左右的低温，病虫害极少，栽培管理粗放，枝条柔软，便于造型，是制作盆景的优良材料。
牛奶果营养丰富，脂肪、蛋白质、铁含量高于苹果、梨、李等水果。含糖量为13%,根和果可供药用，能补血、下乳、收敛；治红白痢疾、淋症肿瘤、乳少、九子烂肠、痔疮、疲倦乏力、黄疸、消化不良、疟疾、淋疤结核、白带、乳腺炎、跌打损伤、腰酸背痛等症。
牛奶果营养丰富，营养成分高于苹果、梨、李、柑桔等多种水果。
牛奶果根和果可供药用，能补血、下乳、收敛；治红白痢疾、淋症肿癌、乳少、痔疮、疲倦乏力、黄疸、消化不良、疟疾、淋巴结核、白带、乳腺炎、跌打损伤、腰酸背痛等症。
牛奶果怎么吃
1.牛奶果的最常见吃法：切成两半用茶匙挖来吃。
2.牛奶果粒炖蛋的吃法
做法：
（1）把鸡蛋顶端敲破一个小洞，流出蛋清，剩下蛋黄。
（2）取180毫升牛奶放适量的糖，放微波炉“叮”温，糖完全溶解就可以，不需沸腾。如果过热了便放一会儿，等稍凉再用。
注意：蒸的时候要用小火，切勿用大火，否则会失败！更重要的是要一直在炉边看着，大概可以的时候用牙签插进去取出，看是否已完全凝固。要炖得嫩滑必须细心和有耐性。最后，蛋黄也不要浪费，用剩下的大概70毫升的牛奶，以同样方法可做出黄色的炖蛋。
牛奶果的价值
牛奶果是星苹果
金星果果肉质地细滑，具柔和甜味，宜鲜食，可制成蜜饯。
其本身没有特殊风味，但与柑橘类尤其是橙类作混合果汁饮料，风味可大大得到改善。除作为果树栽培外，由于其具有伞形树冠和正背面不同颜色的叶片，树形美观，很适于作庭园观赏树或遮荫树。在古巴、牙买加、斯里兰卡、美国夏威夷和佛罗里达等地常作观赏树木。
在日常生活中，很多人喜欢吃牛奶果。因为牛奶果营养丰富，营养成分高于苹果、梨、李、柑桔等多种水果。
公猪采精量和精液品质的变化规律研究报告
猪的汗腺退化，导致其不耐热，加之成年公猪皮肤较厚，散热能力较差，尤其在夏季，我国南方地区长时间的高温天气，对种公猪繁殖性能影响很大，热应激更加严重，具体表现为性欲减退、采精量减少、精子活力下降，死亡精子和异常精子数增加，致使本交或人工授精的母猪受胎率比其他季节有所下降。为了进一步查明我国南方地区大白、长白和杜洛克公猪采精量和精液品质不同月份的变化规律，给今后规模化养猪场和种公猪站确定种公猪的饲养头数以及制定精液生产计划提供可靠依据，特对广西某猪场种公猪站2011～2012年连续两年的采精记录进行统计分析，现将结果报告如下：
一、材料和方法
1.资料选择与整理
选取广西某猪场种公猪站2011～2012年的采精记录（包括死精和无精等），分品种分月份计算平均采精量、精子密度、精子活力和畸形率。公猪均为美系，其中大白80～122头，长白88～109头，杜洛克113～161头。
2.猪舍条件
公猪舍分成两栋，每栋设单体大栏58个，定位栏92个。猪舍为全封闭式，大跨度钢结构屋架，采用液泡粪、机械通风、湿帘降温和高效空气过滤系统，高温天气舍内温度保持在26～28℃。
3.饲养管理
2名畜牧兽医技术人员和2名饲养员负责300头公猪的饲喂、采精、刷拭、栏舍卫生和疫苗注射等工作。①饲喂。一般每天喂料3.5千克/头，日喂2次，饲料按种公猪营养标准配制，在此基础上每头再加2个熟鸭蛋，早、晚各1个。②管理。公猪以定位栏饲养为主，单体大栏饲养为辅，不进行室内、户外运动。每天采精后清理粪便和打扫舍内卫生，每3天刷拭猪体1次。
4.采精
成年公猪每6天采精1次，间隔时间为5天；青年公猪8月龄体重达120千克时每周采精1次，间隔时间为6天。对采集的精液即刻进行品质鉴定，包括称重、测密度、检查精子活力和畸形率，做好记录并输入DPS数据处理软件存档。
5.精液检测方法
①密度检测。采用德国进口的精液密度仪，测量方法：将精液盛装在1000毫升烧杯中，用玻璃棒轻轻搅拌，从中间部位取精液1滴，滴入测试片小孔中，把测试片推入精液密度仪内，1分钟左右即可显示出精子的密度。②活力检测。用200倍的双目显微镜接入电脑显示屏，取1滴精液滴在载玻片上，盖上盖玻片。操作要尽可能快些，否则精子会很快死亡，影响活力的判断。③畸形率检测。取原精液少量，用3%氯化钠溶液10倍稀释，进行伊红或姬姆萨染色。④注意事项。一是取样要有代表性；二是检测精子活力用的载玻片和盖玻片应事先放在37℃恒温板上预热，由于温度对精子活力影响较大，温度越高精子运动速度越快，温度越低精子运动速度越慢，因此，精液也应在恒温板上预热30～60秒后再观察；三是观察检测精子活力时，（）应用盖玻片覆盖载玻片，否则，易污染显微镜的镜头，进而导致每次取样的量不同影响精子活力的评定。
二、研究结果
1.种公站地理位置和气温情况
该种公猪站位于北纬22.47、东经108.59，属南亚热带季风气候，太阳辐射强，日照充足，气候温暖，雨量充沛，夏长冬短，无霜期长，少见冰雪。根据气候学上候温划分四季的标准（候温小于10℃为冬季，大于22℃为夏季，10～22℃为春、秋季），此地无冬季，4月下旬至10月中旬为夏季，10月下旬至次年4月中旬为秋、春季，但大多数年份都有短暂的冬季。
2.三品种公猪各月份采精量
图2资料表明：①不同品种公猪相同月份的采精量。1～6月长白公猪采精量均高于大白公猪，其中1月、5月差异显著（P0.05），2月、3月差异极显著（P0.01），4月、6月差异不显著（P0.05）；7月、8月、11月大白公猪采精量高于长白公猪，其中只有8月差异极显著（P0.01），7月、11月差异不显著（P0.05）；9月、10月和12月长白公猪采精量高于大白公猪，其中只有9月差异显著（P0.05），10月、12月差异不显著（P0.05）；杜洛克公猪全年各月采精量均低于大白和长白公猪，其中除1月与大白公猪之间差异显著（P0.05），与长白公猪之间差异极显著（P0.01）以外，2～12月与大白公猪和长白公猪之间差异均极显著（P0.01）。②同一品种不同月份的采精量。三品种均以12月为最高，5月或6月最低。大白公猪除2～6月相邻月之间、7～9月相邻月之间差异极显著（P0.01），9月和10月之间差异显著（P0.05）以外，其余相邻月之间差异不显著（P0.05）。长白公猪除2月与3月、7月与8月、11月与12月之间差异极显著（P0.01），5月与6月、9月与10月之间差异显著（P0.05）以外，其余相邻月之间差异不显著（P0.05）。杜洛克公猪1～3月、6月与7月、9月与10月、11月与12月相邻月之间差异极显著（P0.01），3～5月、8月和9月相邻月之间差异显著（P0.05）。
3.精子密度
图3资料表明：①不同品种相同月份公猪的精子密度。大白公猪最低。与长白公猪和杜洛克公猪之间差异均极显著（P0.01）；长白公猪除5月、6月、8月略高于杜洛克公猪以外，其余各月份均低于杜洛克公猪，其中除4、7两个月杜洛克公猪高于长白公猪，差异极显著（P0.01）外，其余月份两者差异均不显著（P0.05）。②同一品种相邻月份公猪的精子密度。大白公猪除2月与3月、6月与7月、8月与9月、11月与12月之间差异极显著（P0.01），9月和10月之间差异显著（P0.05）以外，其他月份之间差异均不显著（P0.05）。长白公猪除4月和5月、6月和7月、9～11月相邻月之间差异均不显著（P0.05）以外，其他相邻月之间差异均极显著（P0.01）。杜洛克公猪除9～11月相邻月之间差异均不显著（P0.05）以外，其他月份之间差异均极显著（P0.01）。
4.精子活力
图4资料表明：1、2月长白公猪精子活力最高，大白公猪次之，杜洛克公猪最低，但三品种之间差异均不显著（P0.05）。3月长白公猪精子活力最高，与杜洛克公猪和大白公猪之间差异均显著（P0.05）。4月份长白公猪精子活力最高，与大白公猪和杜洛克公猪之间差异均极显著（P0.01）；大白公猪和杜洛克公猪之间差异不显著（P0.05）。5月、6月和9～12月均以长白公猪精子活力最高，大白公猪次之，杜洛克公猪最低，长白公猪与大白公猪之间差异不显著（P0.05），而长白公猪和大白公猪均与杜洛克公猪之间差异极显著（P0.01）。7月、8月仍以长白公猪精子活力最高，大白公猪次之，杜洛克公猪最低，三品种之间差异均极显著（P0.01）。
5.精子畸形率
图5资料表明：①不同品种公猪相同月份的精子畸形率。1～12月大白公猪精子畸形率均最高。1月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，其中只有长白公猪与大白公猪之间差异显著（P0.05），大白公猪与杜洛克公猪之间差异不显著（P0.05）；2月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，其中长白公猪与大白公猪和杜洛克公猪差异均极显著（P0.01），大白公猪与杜洛克公猪差异显著（P0.05）；3月、4月、6月、12月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，其中大白公猪与长白公猪和杜洛克公猪差异均极显著（P0.01），长白公猪和大白公猪均与杜洛克公猪差异不显著（P0.05）；5月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，长白公猪与大白公猪和杜洛克公猪之间差异均极显著（P0.01），大白公猪和杜洛克公猪之间差异不显著（P0.05）；7月，长白公猪次之，杜洛克公猪最低，大白公猪与长白公猪、杜洛克公猪之间差异均极显著（P0.01），长白公猪与杜洛克公猪差异显著（P0.05）；8月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，大白公猪与长白公猪、杜洛克公猪之间差异均极显著（P0.01），长白公猪与杜洛克公猪差异显著（P0.05）；9月、10月，杜洛克公猪次之，长白公猪最低，三品种之间差异均极显著（P0.01）；11月，长白公猪次之，杜洛克公猪最低，三品种之间差异均不显著（P0.05）。②同一品种公猪相邻月份精子畸形率。大白公猪精子畸形率在1～3月之间差异均不显著（P0.05），3月和4月之间差异极显著（P0.01），4月和5月之间差异显著（P0.05），5月、6月、7月完全相同，7～10月之间差异均不显著（P0.05），10～12月之间差异均极显著（P0.01）。长白公猪精子畸形率在1月和2月之间差异极显著（P0.01），2月和3月之间差异不显著（P0.05），3月和4月之间差异显著（P0.05），4～11月相邻月份之间差异均不显著（P0.05），11月和12月之间差异极显著（P0.01）。杜洛克公猪精子畸形率在1月和2月相同，2～9月相邻月之间差异均极显著（P0.01），9月和10月之间差异显著（P0.05），10月和11月之间差异不显著（P0.05），11月和12月之间差异极显著（P0.01）。
三、讨论
1.大白公猪和长白公猪采精量最低均为5月，杜洛克则是6月，都非当地气温最高的7、8、9三个月，这可能是由于4月中旬开始气温就快速上升，5月就常有33～34℃的高温天气出现，尽管该站采取了防暑降温措施，但舍内温度只能控制在26～28℃，仍然超过公猪最适生存温度（15～18℃），公猪一时难以适应。
2.有报道认为，气温是影响公猪精液品质的重要因素之一，随气温升高公猪精液品质下降，气温下降时精液品质恢复。本研究中公猪精子活力和畸形率各月份的变化规律与之完全相符，而精子密度则与之有所不同，原因目前尚未查清。
3.在研究的三品种公猪中，长白公猪的精液品质最好，这与广西大学动科院蒋如明的研究结果一致。杜洛克公猪除精子活力稍低于大白公猪外，精子密度和精子畸形率指标均优于大白公猪，与蒋如明的研究结果有所不同，这表明最晚引进我国的杜洛克猪经过风土驯化，对我国南方地区的高温环境已经开始适应。
（作者联系地址：石勇祥农秀艳广西横县良圻农场永新畜牧公司邮编：530317；吴建新刘兴华勇仲根广西柳城县天福种猪场邮编：545200）
真鲷饲料小球藻的种类分离与保藏
在生产季节分离出好的小球藻种类，然后接种在培养基上保藏。培养基有固体和液体两种，但以固体最为常用。固体培养基的制作成分有营养液、凝固剂和杀菌剂。营养液的配方及配制方法见后面介绍，但使用浓度应高1倍。凝固剂为琼脂，使用量为1%～5%。杀菌剂多用抗生素，如青霉素、链霉素等，使用量一般视保种时间长短而定。制作方法是按上述要求量取定量的营养液，再加注过滤海水(盐度16左右)到额定配制量，放于大三角烧瓶中，用电炉烧开，然后加入定量的琼脂溶解，分装于试管、小三角烧瓶或克氏扁瓶内。装好后用医用棉或锡纸封口，高压杀菌。待却冷后在无菌条件下接种(接种前加入杀菌剂)。
接种有喷雾接种和接触接种两种。喷雾接种将配制好的藻种母液用杀菌处理后的小喷雾器均匀喷到培养基表面即可；接触接种可用接种环沾取少许藻种母液用划线法均匀涂于培养基表面。所有操作过程严格控制无菌作业。接种后立即密封，进行保种培养。保种培养根据保种时间确定保种培养条件，主要 为温度和光照。若在5仁的低温和弱光下保存，其保藏时间可长达1年多。
水蛭的活动规律
水蛭的生活习性，完全反映出它对温度、水质、地理环境及食物的需求和适应特性，实质上是水蛭的生态学特征。水蛭的生态学特征包括栖居地，活动规律、食性等。
(一)水蛭的栖居地
栖居地是动物对生态环境的选择与适应的最直观的综合反应。水蛭对栖居地的气候环境条件、地理状况等的适应性有其独特之处。
水蛭属软体柄息动物，喜欢在石块较多、池底及池岸较坚硬的水中生活，这些环境有利于吸盘的固着、运动和取食、一般来说，水蛭在岩石底上较多，其次是石子底，有泥沙碎石的泥沙底，而在深水的淤泥中最少。水草或藻类较丰富的水域?水蛭相对较多，这有利于其隐蔽和栖息。水蛭有时也爬上潮湿的岸边活动。
因此，岸边土壤潮湿，草丛丰富将有利水蛭栖息和交配繁殖。在养殖水蛭过程中要根据上述环境特点，为其创造适宜生存栖息和繁殖的环境条件。
(二)水蛭的活动规律
水蛭在冬季气温低于1，以下时，在泥土中蛰伏越冬潜伏的深度一般为1525厘米，长江流域浅些，715厘米。34月份出蛰活动、白天常躲藏在水中的石块、杂草之下或水中潮湿的泥土中隐蔽场所，很少在外边活动，夜间则活动频繁，出来觅食。
一般情况下，水蛭多生活在含溶解氧0，7毫克所以上的水域里，低于一定的溶氧度时，水蛭就纷纷钻出水面，爬到岸边土壤草丛中，呼吸空气中的氧气。在空气闷热，低气压的天气，水中的溶氧量较低，水蛭表现出不安并向水面或岸上移动，所以利用蛭类的这种活动规律可预报天气变化。
(三)水蛭的食性
不同的蛭类其食性不同。在上述三种药用水蛭中，日本医蛭以吸食脊椎动物的血液为主，吸食，对象有：人、家畜、蛙类、鱼类等。宽体金线蛭、茶色蛭主要吸食无脊椎动物的体液或腐肉，如蚌、田螺，蚯蚓、水生昆虫等，有时也吸食水面或岸边的腐殖质。养殖过程中要因地制宜地选喂合适的食物。
细粒棘球蚴侵染哈萨克绵羊早期血清IgE、IgM的变化规律研究
细粒棘球蚴病又称包虫病，是由细粒棘球绦虫的幼虫（续绦期）寄生在各种中间宿主（人和食草动物如牛、羊）的肝脏、肺脏等器官内发育为包囊引起的一种人畜共患病。绵羊是细粒棘球绦虫最适宜的中间宿主，在中国西部牧区，绵羊包虫病已经严重地影响了养羊业的发展和农牧民生活质量的提高。包虫在宿主体内经过了长期适应过程，可从宿主体内摄取营养而生存，并且基本上与外界环境隔绝，具有扰乱或逃避宿主机体免疫反应的能力，因此包虫病的免疫学研究仍然是目前的研究热点之一。本试验在前期研究基础上，以哈萨克绵羊为中间宿主，检测宿主在人工感染细粒棘球蚴后不同时期血清IgE、lgM的变化规律。下面我们就一起来看看细粒棘球蚴侵染哈萨克绵羊早期血清IgE、IgM的变化规律研究.
1、材料与方法
1.1实验动物
实验绵羊：新疆生产建设兵团第九师165团羊场提供哈萨克绵羊用于包虫病检测；随后对其随访并筛选出6只无包虫病健康哈萨克绵羊用于人工感染包虫虫卵实验，购买并饲养于石河子大学动物科技学院试验站实验羊舍。
细粒棘球绦虫：从患细粒棘球蚴病的试验犬体内分离。
1.2主要试剂与仪器
试剂：绵羊包虫ELISA诊断试剂盒购自上海邦奕商贸有限公司；绵羊血清抗体(lgE、lgM)ELISA试剂盒均购自上海蓝基生物科技有限公司。
仪器：多功能酶标仪（olymps-2700）；恒温生化培养箱；SGF-02.500干燥箱；台式高速离心机。
1.3试验方法
细粒棘球绦虫分离：试验前，试验犬用吡奎酮和丙硫苯咪唑驱虫（用10mg，/kg），然后注射地噻米松降低其免疫力，用患细粒棘球蚴病羊的肝脏饲喂试验犬，连续饲喂7天，60天后检测到粪便有细粒棘球绦虫卵排出者为试验犬感染了包虫病。将感染包虫病的试验犬麻醉、宰杀，从犬的小肠前段（主要是十二指肠和空肠前段）绒毛内分离细粒棘球绦虫，挑出带有成熟孕节的虫体（虫体长3～8mm，一般由3-4个体节组成，最多含有7个体节，头部呈梨形，端部略窄，上具顶突和4个吸盘，顶突有两排约28-50个小钩，末端体节为孕卵节片。）显微镜下分离计数。
人工感染：用注射器将成虫孕节直接注射到绵羊食管中，每只约10000～15000枚，用生理盐水反复注射2次，确保孕节不遗留在注射器内。在喂服Oh、6h、8h、loh这4个时间点，颈静脉采集所有羊的外周血，采集后室温静置30min，3000r/min离心15min，取上清，-20℃保存。参照绵羊ELISA试剂盒说明书，检测血清中IgE、IgM的水平。
1.4数据处理
采用SPSS13．O软件进行单因素方差分析。结果以“平均数±标准差(X±S)”表示。
2、结果
IgE检测：如表1所示，血清IgE抗体在细粒棘球蚴早期感染过程中，血清IgE的浓度在喂服后各时间段依次升高，但与喂服前(Oh)相比极显著下降(P0.01)。
IgM检测：如表2所示，在整个实验感染过程中，血清IgM的浓度在喂服后各时间段与喂服前(Oh)相比极显著升高(P0.01)，喂服后各时间段之间无明显变化。
3、讨论与小结
IgE:重链为￡链，在血清中以单体形式存在，是种属进化过程中最晚出现的Ig，也是血清中含最低的Ig，半衰期约为2.8天，在血清中含量极微，仅占血清19总量的0.003%。但是在过敏性疾病和寄生虫感染的患者血清中，特异性IgE含量显著提高。主要由呼吸道和肠道上皮下的浆细胞分泌，有能够与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合的免疫功能，可吸附在肥大细胞上，第二次接触蠕虫抗原时，可由肥大细胞释放组织胺等血管活性物质，引起平滑肌收缩，发生肠痉挛，同时肠壁血管通透性增高，导致抗体渗出，吞噬细胞游出，前往围聚虫体，以加强对蠕虫的抗御作用，从而引发强烈的免疫反应。研究报道，感染细粒棘球绦虫的病人血清中IgE抗体在肠道免疫中发挥着重要的作用，尤其是在六钩蚴杀伤过程中扮演着重要角色。体内试验显示，包虫虫卵从口服感染进入机体经胃、十二指肠肠道孵化为六钩蚴约需2h左右，本研究发现，血清IgE抗体在包虫虫卵感染至6h这段时间，感染后与感染前相比极显著下降(P0.01)，可能是现有抗体与抗原物质结合，形成抗原抗体复合物，因此IgE抗体下降。但在喂服8h后IgE抗体开始增高，与杜迎春研究相同。推测喂服8h后可能为六钩蚴穿越肠壁进入血液的过程，此时虫体移行，虫体不断释放可诱导抗原能强有力的诱导B淋巴细胞产生IgE抗体，从而使绵羊血清中IgE抗体分泌增高。
IgM:重链为μ链，IgM分为膜结合型和分泌型：膜结合型IgM为单体IgM，表达位于B细胞表面，构成细胞抗体受体，也是细胞表面抗原受体的主要成分。血清中IgM是五聚体，分子量950KD，约占血清的5%～10%左右，无铰链区，是分子量最大的免疫球蛋白，又称巨球蛋白；lgM不能通过血管壁，主要存在于血液中，是高效能的抗生物抗体，其杀菌、溶菌、促吞噬和凝集作用比IgG高15倍以上，抗体结合价和补体激活能力大于IgG，具有高效的抗感染作用，是种属进化和个体发育过程中最早产生的抗体，也是初次免疫应答中最早产生的抗体，机体初次免疫应答时产生的抗体IgM在早期感染中发挥重要的免疫防御作用，血清中某中病原体特异性IgM水平升高，提示近期发生感染，有助于感染性疾病的早期诊断。Pater等在小鼠上报道，Balb/C小鼠（包虫病易感小鼠）在口服多房棘球绦虫虫卵1周后机体血清IgM水平显著下降，直到感染后第8周才开始上升。本研究发现，血清IgM抗体在整个感染过程中，喂服包虫虫卵后IgM抗体与喂服前相比极显著升高(PO．01)，这与张文宝和杜迎春等报道的棘球蚴感染早期就可检测到IgM的结果一致，在喂服后的6h、8h、10h这3个时间段抗体浓度无显著变化。推测哈萨克绵羊在感染细粒棘球蚴后其自身分泌的相对较高的IgM抗体在虫体的早期感染中可能发挥了免疫防御作用。
本实验对哈萨克绵羊人工喂服包虫虫卵后的血清IgE、IgM浓度进行跟踪监测，分析哈萨克绵羊喂服包虫后的血清IgE、IgM变化趋势，结果表明哈萨克绵羊在人工口服包虫虫卵10h内血清IgM抗体升高，血清IgE抗体下降，可为临床上诊断该病提供一定的理论依据。
牛细菌性脑膜脑炎的病因 牛细菌性脑膜脑炎的诊断与防治
细菌性脑膜脑炎多发于3~8日龄的犊牛,与机体免疫球蛋白低下和环境中高浓度细菌的威胁有关。早期临床症状为嗜睡,精神沉郁,无法吮吸,迅速发展为感觉过敏,角弓反张并死亡。据报道,病牛有强制性的走动和头部低垂的现象,但不常见。尽管应用大剂量的抗生素和支持疗法,预后仍然不良。下面一起具体来了解一下：牛细菌性脑膜脑炎的病因牛细菌性脑膜脑炎的诊断与防治。
1、病原学
被动抗体转移失败和犊牛生活环境中高水平细菌的威胁导致菌血症，局部并发于脑膜。与在牧场出生的奶牛相比，该病多发于出生在室内产箱不清洁的犊牛。犊牛或母牛的因素可能导致犊牛在出生后的6h内不能消化相当于其体重7%的初乳。难产、虚弱、神经损伤、犊牛室过度拥挤、乳房形状、乳头不干净和母牛过度焦虑都可能影响或推迟犊牛产生吮吸行为。难产、神经损伤、低血钙症和虚弱可能造成母牛卧地时间延长。营养条件差、较短的干奶期和乳房炎可导致乳房中初乳量降低。初产牛的初乳比经产牛的初乳少25%。细菌通过口咽途径、呼吸道、消化道或脐带进入机体，引发菌血症。从患有脑膜脑炎的犊牛腰部脑脊液中，常能分离到埃希氏大肠杆菌和链球菌属。
2、病理学
败血症病灶多位于脑膜血管，或者迅速被包围起来，或者发生弥散性化脓性脑膜炎。分泌滑液处、脑膜和眼内局部的联合处几乎总是链球菌的滋生地；大肠菌群感染很少造成眼内炎。一旦细菌获得进入柔脑膜的途径，由于柔脑膜几乎没有抵抗细菌传播的能力而导致炎症蔓延。第一天，脑膜是不透明的、充血的，2天内基底池内有脓汁聚集，这在大脑表面很难显现。在大脑半球的上方，分泌液主要局限于脑裂。在疾病的急性阶段，大脑发生水肿，严重时可将小脑挤入枕骨大孔和锥角。
3、诊断依据
早期症状包括肉犊牛缺乏吮吸反射，精神沉郁，不跟随母牛走动，体质虚弱。发热不是特征性症状。感染的犊牛颈部紧张，头抬得较低。颈部弯曲时疼痛，有时会呻吟。如果得不到适当的治疗，在接下来的6~12h，犊牛会变得更加虚弱，步态不稳，甚至不能站立。饲养管理人员是十分重要的，因为在检查肉犊牛时，极易忽视该病的早期临床症状，如嗜睡、虚弱等，特别是在恶劣的天气条件下犊牛成群卧倒时。单栏饲养的奶牛犊中更易发现犊牛精神沉郁和食欲下降。随着病程的发展，犊牛逐渐失去了胁迫反射，向背内侧斜视。在这个阶段，经常出现巩膜表层充血。精神沉郁逐渐变为昏迷，但是静脉注射抗生素时，犊牛对突如其来的听觉和触觉刺激持有高度的敏感性。在疾病的濒死期，即在发现临床症状后的24~36h，病牛出现角弓反张。资料表明，感染可波及其他器官系统，例如眼前房积脓、多发性关节炎、腹泻和脐静脉炎。尸检时，经常发现肝脏和肾脏中有梗死灶。对10头患有脑膜脑炎的犊牛进行研究，发现其中3头犊牛患有多发性关节炎，3头犊牛患有眼前房积脓，2头犊牛患有脐静脉炎，但没有发现腹泻的症状。
细菌性脑膜脑炎的重要鉴别诊断是在为期2~3d的腹泻后机体发生代谢性酸中毒。败血症时出现的临床症状与脑膜脑炎相似，因为在初生犊牛中，脑膜是细菌繁殖的常见部位。
4、防治
治疗的关键在于饲养员及时发现犊牛异常行为，以及兽医对腰部脑脊液进行检查后迅速作出临床诊断。在兽医诊断和实施治疗的过程中，任何延迟都可能导致预后不良，但是应用氯霉素进行迅速治疗，可以达到30%的治愈率。虽然很少的广谱杀菌抗生素能够穿透完整的血脑屏障，但普遍认为，在细菌性脑膜脑炎疾病中血脑屏障受到了破坏，从而增大了抗生素渗透的浓度。细胞膜渗透性升高可以允许足量的抗生素进入脑脊液，达到最小杀菌浓度。脑脊液中抗生素浓度峰值能达到有效的最小杀菌浓度的10~30倍是十分重要的。值得注意的是，在细菌性脑脊液感染刚刚出现临床症状时，应该尽快应用高剂量的抗生素进行治疗。
据报道，治疗革兰氏阴性杆菌引起的脑膜炎时最好的药物是第三代头孢菌素，特别是头孢噻肟钠，但是在兽医文献中，没有关于牛传染性神经疾病应用头孢噻肟钠的实验数据。可以用来治疗细菌性脑膜脑炎的其他抗生素包括联合应用磺胺三甲氧苄胺嘧啶或头孢噻呋。
