[每周一例]南美白对虾感染肝肠胞虫(EHP),零星死亡


[病例526]广东中山阜沙黄老板养殖南美白对虾,池塘面积5.5亩(图1),水深1.5米,2019年8月4日放“一代苗”50万尾,之后过塘出苗25万尾,余下约有14万尾。分塘后早期养殖一直有死虾,每天1-2尾。10月中旬虾规格80~90尾/斤。

10月13日至14日,降温,连续两天吹北风,未见明显倒藻。

10月15日,在下风口发现有少量白便(图2),早晨见底罾死虾增多至7-8尾,对虾吃料没有减少,每日3餐共计45斤。

10月17日至18日,拌料内服“氟苯尼考”+“营养快线”,连续2天。

10月18日,到塘头从料罾取15尾肠胃饱满的正常虾(图3),抛网取13尾肉眼见外观异常的虾,即空肠或空胃,部分肠胃也较满但手摸虾体发软,瘦弱,活力差,似棉花虾的前期症状(图4)。分别从虾样的肝胰腺组织分离细菌,划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA培养基),室温条件下培养48h;取虾样的鳃、肌肉、肝胰腺组织,用95%酒精固定,送实验室进行PCR检测;取肝胰腺、肠组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。

结果显示:培养48h后,接种肝胰腺组织的培养基有少量菌落长出(图5),经鉴定多为希瓦氏菌属、弧菌属。槽式PCR检测正常虾样组肝肠胞虫(EHP)的检出率为60%(9/15),异常虾样组为77%(10/13);正常虾样组白斑综合征病毒(WSSV)检出1尾阳性,异常虾样组2尾阳性;肝胰腺细小病毒(HPV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)均呈阴性。

病理组织切片观察显示正常虾样肝胰腺组织均不同程度自溶,可见有肉芽肿20%(3/15)及虾肝肠胞虫13.3%(2/15),肝肠胞虫位于肉芽肿坏死灶内和上皮细胞胞质内;肠道组织多数正常,仅有一尾虾肠腔内有大量脱落细胞(图6);异常虾样肝胰腺组织严重萎缩,大量腺管崩解、腺管间细胞增生,可见有肉芽肿61.5%(8/13)及虾肝肠胞虫53.8%(7/13),部分样品肉芽肿坏死灶内除有肝肠胞虫,还有大量细菌;肠道组织多数正常,部分组织增生,上皮脱落(图7)。

10月下旬开始每天用“营养快线”(多种维生素等)+“LY-生命素”拌料保健,同时加强改底、增氧。

11月上旬回访,池塘一直每天有少量几尾死虾,与其它池塘比较吃料没有明显异常。

分析:1、本案例南美白对虾虽然没有表现出吃料明显减慢,也没有发生严重死亡,但部分严重感染肝肠胞虫的虾瘦弱、发软,肝脏形成肉芽肿(坏死),零星死亡,异常天气或水质剧烈变化时,死亡量增加。

2、组织病理切片显示对虾肝胰腺有大量肉芽肿,是虾体本身启动的防御机制,肉芽肿灶心内有大量肝肠胞虫,部分肉芽肿内有大量细菌,说明发病虾肝胰腺坏死(肉芽肿)与感染肝肠胞虫或继发细菌感染有关。(利洋公司技术部王林锁张吉鹏唐绍林利洋水产药店阜沙店黄一明李明响提供2019.11.7)

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[每周一例]南美白对虾肝肠胞虫(EHP)和肝胰腺细小病毒(HPV)混合感染



[病例527]广东省中山市阜沙镇一南美白对虾养殖池塘(图1),面积11亩,水深1.6米,2019年7月28日放南美白对虾虾苗34万尾,放草鱼20余尾。10月初对虾规格约65尾/斤。

10月初以前南美白对虾一直吃料稳定,每天正常加料1~2斤,时不时看到“罾尾”有1-2尾虾的肝胰腺萎缩,空肠空胃。

10月8日开始慢料,在底罾忽然发现死亡4-6尾,抛网观察虾较多空肠空胃,怀疑缺氧,马上刮虾销售,卖虾2600斤,刮虾时发现虾体质较弱,网没有插电也容易上网。

卖虾后池塘估计还剩余800~1000斤虾,继续养殖。但吃料一直加不上去,保持10多斤料的量,晚上一直有小规格的虾爬边。

10月18日抛网检测池塘剩下的虾多数体色偏黄,肠道细,肝胰腺上白膜发黄,有些肝胰腺不同程度萎缩;约1/3的虾肠胃不饱满或空肠或空胃,有的肝萎缩或肠道有水气,有的瘦软,虾无力或活力差;下风口有少量白便(图2)。

取虾30尾虾,其中15尾外观较健康(图3),15尾外观异常的虾(图4),接种肝胰腺划线于胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA),室温条件下培养24h;取肝胰腺用95%酒精保存,送实验室做PCR检测肝肠胞虫和病毒;取肝胰腺和肠组织固定于波恩氏液中用以做组织切片进行组织病理观察。

结果显示:常温下细菌培养48h后,健康虾组1/15尾虾肝胰腺长出较多的细菌,异常虾组4/15尾虾肝胰腺长出菌落,利用副溶血弧菌特异性基因tlh鉴定为副溶血弧菌阳性(图5)。槽氏PCR检测结果显示,健康虾组中虾肝肠胞虫(EHP)检出率为20%(3/15),异常虾组为46.7%(7/15);健康虾组白斑综合征病毒(WSSV)阳性率为6.7%(1/15),异常虾组为阴性;传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)均为阴性。

组织病理切片观察结果,健康虾肝胰腺组织均有不同程度的自溶,但仍可见有肉芽肿26.7%(4/15)及虾肝肠胞虫20%(3/15),肝肠胞虫位于肉芽肿坏死灶内和腺管上皮细胞胞质内;另外,腺管内观察到肝胰腺细小病毒(HPV)包涵体13.3%(2/15);肠组织未见显著异常(图6)。异常虾肝胰腺组织病变严重,腺管严重萎缩,大量崩解,腺管间大量的细胞增生,可见处于不同时期的肉芽肿78.6%(11/15)及虾肝肠胞虫57.1%(8/15),有些肉芽肿灶心已呈干酪样坏死;还观察到大量的肝胰腺细小病毒(HPV)包涵体50%(7/15);肠道组织多数正常,部分上皮脱落,其中一尾虾肠腔内有大量的虾肝肠胞虫(图7)。

11月4日,近期一直每天在底罾有少量几尾死亡,降温,卖虾。

分析:1、本病例南美白对虾感染虾肝肠胞虫后表现出吃料差,外观瘦弱、干瘪,活力差等症状,平时零星死亡,蜕壳期或缺氧、天气或水质剧变后死亡量增加(参见【病例】525-526)。虾肝肠胞虫(EHP)PCR检出率越高、组织病理观察病变越严重,对虾发病越严重。

2、组织病理观察发现,除了在肉芽肿坏死灶的灶心有大量的虫体聚集,也有大量HPV包涵体的出现,据资料HPV主要危害幼虾,本病例对虾规格较大,发病对虾HPV包涵体数量比“正常虾”多,说明可能HPV和虾肝肠胞虫共同引起肝胰腺萎缩和坏死。(研究所一室戚瑞荣李德意卢恩秋,技术部唐绍林张吉鹏王林锁提供2019.11.14)

[每周一例]成功处理南美白对虾“黄身”



[病例533]广东省台山市都斛镇金星村,有一口10亩的南美白对虾养殖池塘(图1),平均水深1.1米,4台1.5kW的叶轮式增氧机。2019年7月3日放高抗苗26万尾。

8月6日,晴。上午塘头服务,客户反映:虾一直加不上料,有时候料台里能看到几只发黄的虾,不知道怎么回事。遂抛网看虾,体色较黄的虾占到2成,其它虾也是体色微黄,未发现其它明显病症(图2)。用水质快速检测盒测得水体:pH值8.2,氨氮0.4mg/L,亚硝酸盐0.2mg/L(图3)。建议使用“福地安Ⅱ”连续改底3-5天,2瓶/次。

8月10日,晴。客户反映:连用了4天的“福地安Ⅱ”,虾吃料越来越快了,吃料时间由2.5小时缩短到1.5小时。抛网看虾,虾体色也都变透亮了(图4)。客户很认可其效果,打算其它三个塘也使用相同方法连续改底2-3次。

分析:1、台山都斛地区通常养殖一批虾出虾后均不做干塘处理,杀蓝藻和野杂鱼虾后接着放苗,放苗后因为喂料少也很少改底。因此,第二批虾养殖前期,塘底还原化、酸化比较严重,易造成虾步足、游泳足以及虾体发黄。

2、“福地安”为弱氧化性底质改良剂,刺激性小,少量多次使用能有效提高池塘氧化还原电位,减轻塘底还原化、酸化,改善虾体发黄,起到明显效果。(利洋水产药店都斛店徐磊提供2020.2.27)

[每周一例]大菱鲆棚的循环水养殖南美白对虾气泡病死亡



[病例529]山东海阳行村有一口南美白对虾半精养高位池,池塘面积1亩,放苗3-4万尾,水深0.8~1m,没有充氧设备(图1)。养殖水源主要来自大菱鲆养殖棚排出的“废水”,2019年8月中旬虾规格约30尾/斤。

8月17-19日,天气一直多云,正常投喂,未发现虾异常。

8月20日,晴,气温明显升高。下午五点塘主电话反映池塘内忽然发现死虾,死亡4斤左右,希望到现场处理。傍晚六点左右,利洋技术员到达现场,观察死虾肌肉白浊(图2),尾扇(图3)和游泳足(图4)内有气柱。池塘水色较浓,呈黑褐色,哈希溶氧仪检测水中溶解氧含量“爆表”(图5)。

带水样和虾样回店做进一步检测,镜检虾尾扇(图6)和游泳足(图7)内有大量气柱,无其它明显病灶,快速水质测试盒测得水体pH值9.0,亚硝酸盐0.07mg/L。

根据症状和水质情况初步诊断对虾突发死亡可能是气泡病引起,马上加大换水量,降低藻类丰度;使用“永乐碘”1瓶/亩,防止继发细菌感染,加重死亡;外用抗应激产品减少应激。

8月21日,多云,捞死虾2斤左右,都不是新鲜死亡的虾。

8月22日,多云,客户反映没有新增死虾。

之后,对虾没有出现异常,恢复正常。

分析:1、发病池塘面积小,水浅,大菱鲆养殖排出的水有很多残饵、粪便等,导致对虾池“肥料”较足,加上天气较好,藻类大量繁殖,水中溶解氧严重过饱和,引发对虾急性气泡病死亡。

2、对虾急性气泡病以中小规格对虾发病为主,像这样大规格虾发病死亡比较少见,因为处理及时,没有造成大量损失。(利洋水产药店行村店林琳童2019.11.28)

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