1起竹鼠感染大肠杆菌的诊断

赵玲1,2严娟3段新慧1尹革芬1杨贵树1李文贵1*

1.云南农业大学动物科学技术学院,昆明650201;2.中国科学院昆明动物研究所,昆明650223;3.云南省农村科技服务中心,昆明650021

竹鼠又名竹狸、竹根猪等,属于脊椎动物亚门哺乳纲啮齿目竹鼠科竹鼠属,是我国南方珍贵的特种野生动物之一。竹鼠肉质细嫩、精瘦,富含钙、磷及多种维生素和氨基酸,味道鲜美,而且脂肪和胆固醇的含量较低,营养价值高,颇受消费者欢迎。竹鼠的肉、血、胆、油、牙均可入药,全身是宝;加之竹鼠的繁殖能力强、生长发育快、适应性广、占地少,近几年其养殖业越来越受到人们的关注。我国自20世纪90年代初驯养竹鼠成功后,发展很快,现已成为开发价值高、市场需求大、投资小、风险低、效益高的养殖新项目。竹鼠养殖目前主要分布在广西、广东、福建、安徽、贵州、云南等地。

随着竹鼠养殖业的发展,疾病的发生也逐渐增多。本文报道了一起竹鼠感染大肠杆菌的诊断过程。

1材料与方法

1.1临床观察及剖检

2013年6月,玉溪市峨山县某竹鼠养殖场暴发了以病鼠食欲不振、精神沉郁、腹泻、后肢瘫痪、走路后躯拖地爬行(有的出现后躯肌肉震颤)等为临床特征的疫病;不同年龄、不同性别的竹鼠均可发病,死亡率较高。为确定此次发病的原因,在与畜主进行交谈并收集发病经过等相关信息后,对4只送检竹鼠进行了解剖、细菌分离鉴定和组织病理学观察。

1.2病原分离鉴定

取实质器官有典型病理变化的部位,无菌接种至普通琼脂平板培养基和麦康凯琼脂平板培养基,37℃培养24h;挑取可疑菌落再次接种至麦康凯琼脂平板培养基,37℃培养24h,以获取单个菌落细菌;经革兰氏染色,光学显微镜观察细菌的形态及染色特点,结合生化试验等对所分离细菌进行鉴定。

1.3组织病理学观察

取有明显病变的实质器官,如心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠管等,按组织病理学采样法取样,置于10%多聚甲醛-戊二醛混合固定液中固定48h以上;将固定好的组织修块,梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,制作成厚4μm的连续切片;切片入二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水,苏木素染色10min,盐酸酒精分色,自来水蓝化,伊红酒精染色,酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,光镜观察、照像,记录病变特点。

2结果与分析

2.1剖检病变

剖检可见胸腔、腹腔有大量淡黄色积液;胃黏膜溃疡、糜烂,内容物呈黑色;十二指肠肠管呈红褐色、肠系膜胶冻样肿胀,盲肠鼓气(图1-A);肝脏微肿、质地较脆,有针尖大小的出血点;下颔淋巴结、肺门淋巴结肿胀,肺脏有大量出血点;尾根两侧皮下出血(图1-B);膀胱充盈,膀胱壁有点状出血。

2.2病原分离鉴定

病料在普通琼脂平板上形成中等大小、圆形凸起、表面光滑、乳白色、边缘整齐的菌落,在麦康凯琼脂培养基上形成红色菌落;革兰氏染色呈阴性,为两端钝圆的短杆菌;生化鉴定结果符合大肠杆菌的特性;与O型分型血清可凝集,故该血清型大肠杆菌为病原性大肠杆菌。

2.3组织病理学变化

经石蜡切片和苏木素-伊红染色、镜检观察发现:心肌明显出血(),心肌动脉充血,心肌静脉瘀血;肝细胞紧缩在一起,淋巴细胞增生,门管区化脓、出血和瘀血;脾脏大量瘀血;肺脏瘀血,肺泡管内有炎性渗出物,肺泡壁增厚,为化脓性肺炎;肾出血和瘀血,肾小球肿大,管腔内充满大量积液;结肠固有层轻度出血和水肿,杯状细胞增多,呈卡他性肠炎,肠腔内有炎性分泌物(图2)。

综合临床症状、剖检病变、组织病理学病变和病原培养的形态特征及生化特征,确诊该场竹鼠发生的疫情为大肠杆菌感染所致。

3讨论

竹鼠大肠杆菌病是由一定血清型大肠杆菌及其肠毒素引起的一种呈暴发性、死亡率很高的肠道传染病,主要以患鼠出现胶冻样或水样腹泻直至严重脱水为特征。大肠杆菌病一年四季均可发生,但春、夏两季更为常见。各年龄段的竹鼠都可感染,带毒竹鼠为主要传染源。在发病季节用恩诺沙星或磺胺间甲氧嘧啶钠拌料可预防本病。当竹鼠拉稀,且粪便中出现白色呈果冻样的液体时可用庆大霉素或新霉素进行注射治疗,也可采用新霉素和先锋霉素治疗。

大肠杆菌病是竹鼠常见的一种疾病,与环境、温度、饲料、饮水等因素密切相关,应当进行综合性防制。如定期对舍内外进行消毒,保持适当的密度和适宜的温湿度,避免温度骤变等应激因素的刺激,创造符合其生活习性的生存环境,有条件的可以接种大肠杆菌多价灭活苗或自家苗。同时,要选择好的竹鼠品种饲养,正确进行配对和配种,提高竹鼠繁殖率。

随着竹鼠养殖业的不断发展,出现了越来越多的竹鼠疾病。养殖户应在做好饲养管理的同时,开展竹鼠肠炎、感冒、咬合不正等非传染性疾病及葡萄球菌病、大肠杆菌病、真菌病、多杀性巴氏杆菌病等传染病的提前预防,减少发病率及死亡率。保持对疾病的警惕性,做到早发现、早处理。

参考文献

徐仕银,穆贞军,韩勇.竹鼠高效养殖实用技术.贵州畜牧兽

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鸭大肠杆菌病的临床症状 鸭大肠杆菌病的诊断和防治方法


鸭大肠杆菌病是禽类比较多发的一种疾病,在临床上多表现为急性,具有败血性传染特点。某鸭业有限公司合作农户的养殖规模较小、环境条件较差、专业饲养与疾病防治技能有限,多种细菌病的发病率较高。大肠杆菌与传染性浆膜炎两种细菌病的发病率最高,而且两种病在症状、剖检变化等方面又较难鉴别诊断。下面一起具体来了解一下:鸭大肠杆菌病的临床症状鸭大肠杆菌病的诊断和防治方法。

1、发病机理

大肠杆菌存在于肠道内,基本上可分成两大类,即有害菌群、有益菌群。该菌是一种革兰氏阴性短杆菌,菌体两端钝圆,周身生有鞭毛,能够自行运动,还有部分能够生成荚膜,存在菌毛,但无法形成芽孢。该菌广泛存在于土壤、污垢等地,当条件适宜时,如在温度在37℃、湿度60%以及适量营养的条件下就能够大量繁殖,也叫做条件性致病菌。

在适宜的环境中,大肠杆菌能够经由耳、眼、鼻、喉、消化道黏膜或者空气进入鸭体内定植,通过口腔进入的病菌能够抵抗消化道内消化液的溶解,从而可侵入血液,并通过血液循环移植到肠系膜、肝脏、肺脏、脾脏或者脚爪垫、眼结膜等器官内,并在该处进行定居繁殖,并分泌内毒素损害组织细胞,使其出现增生、膨胀,还能够结合食物,对肠上皮细胞造成刺激,从而使病变加重,还可结合到病菌上的菌毛附着因子K88ab、K987、K99抗原、黏性胶样物质以及小肠上皮细胞上,激活环腺甙酶而导致细胞内积聚CAMP(环磷酸腺甙),导致更多的重碳酸与钠交换,促使细胞内水分渗入到肠腔,从而引发腹泻和脱水,甚至由于严重脱水发生死亡。

2、临床症状及病理变化

患病雏鸭主要表现出精神萎靡,食欲不振或者完全废绝,但增加饮水,排出混杂气泡的糊状灰白色稀粪,接着发生水样腹泻,粪便粘污肛门周围的羽毛,一侧或者双侧的眼睑发生肿胀,流泪,畏光,甚至黏性分泌物将眼睑黏连在一起,部分会具有神经症状,如扭颈、打转等,还有些关节会发生肿胀,出现跛行,触诊存在波动感,且局部温度有所升高,病程通常能够持续1—3天。对病死鸭进行剖检,特征性病变是败血症。肝脏呈胆汁状的铜绿色或者青铜色,发生肿大,表面有一层乳白色或者浅黄色纤维素性渗出物覆盖,非常容易被剥离,质地变脆;胆囊发生肿胀,含有大量胆汁;肺脏存在淤血或者发生水肿;心包膜有所增厚,呈不透明的乳白色,心包积液、混浊;气囊膜有所增厚,且变得混浊,附着有黄色的干酪样渗出物;脾脏呈黑色斑纹状,发生肿大,存在出血点;腹膜发生渗出性炎症,存在淡黄色的腹水,肠壁发生肿胀,黏膜存在充血或者出血,有时卵巢也发生出血,甚至卵黄破裂。

3、实验室诊断

病料采集。在无菌条件下取自然死亡和扑杀病鸭的血液、心脏、肝脏和脾脏等作为病料,送到上级动物疫病诊断中心,制成涂片后进行革兰氏染色镜检,能够在肝脏涂片中发现两极着色较深的革兰氏阴性短小杆菌,往往单个分布或者散在。

细菌分离。在无菌条件下取典型病鸭的肝脏组织在肉汤中接种,置于37℃温度下进行24h培养,之后转移到SS培养基上接种,置于37℃温度下进行24h培养,能够长出圆形的红色菌落,表面湿润,边缘整齐。挑取典型菌落涂片后进行染色镜检,能够看到革兰氏阴性短杆菌。

生化试验。挑取病菌接种在三糖铁斜面上,置于37℃温度下进行24h培养,发现斜面和底部颜色变黄,并产生气体,能够使乳糖、葡萄糖以及麦芽糖发酵,产气产酸,不能够使蔗糖发酵,MP实验呈阴性,能够还原硝酸盐,生成靛基质。

动物实验。取以上分离得到的菌株18h培养液,给5只小白鼠进行腹腔接种,每只注射0.5mL.或者给相同体重的健康鸭接种,每羽1~2mL,注意设置对照组,发现接种细菌培养液的小白鼠或者鸭都在24—72h内发生死亡,并能够得到病菌,而对照组没有出现病菌。

4、防治措施

药物治疗。由于大肠杆菌容易形成耐药性,因此治疗前最好进行药敏实验,根据结果选择敏感性高的药物,并定期更换其他药物或者交替使用几种不同的药物,确保治疗效果良好。病鸭可按体重内服20mg/kg氟甲砜霉素,每天1次,连续使用3~5天,也可按体重肌肉注射15~20mg/kg氟甲砜霉素注射液,每天1次,连续使用2天。也可使用硫酸卡那霉素进行全群饮水,按每升饮水添加30~50mg药物,完全溶解后任其自由饮用,连续使用3~4天。还可使用氟哌酸进行全群饲喂,每千克饲料添加0.5g药物,连续使用4天,停止用药2天,再连续使用4天。通过以上措施,能够快速控制住病情,鸭群没有出现发病和死亡,精神、食欲状态以及排粪等逐渐恢复正常。

加强雏期管理。雏鸭人舍前,要对料槽、水槽、用具进行彻底洗刷,之后在自然条件下晾干,接着在按1:2000比例稀释的百毒杀溶液中浸泡th,鸭舍在进雏前l天采取熏蒸法进行l遍全面消毒,并确保地面温度适宜,一般距离地面20cm内的温度适宜控制在32~35℃左右,创造温暖舒适的环境,增强机体免疫力,避免发生该病。育雏第一周的前3天,要采取饮水消毒,即供给0.1%高锰酸钾液,每天1次;经过2周,在供给按1:3000比例稀释的双碘霸王饮水2h。

鸭大肠杆菌病的流行特点
各个日龄的鸭均可发生,尤以2周龄~6周龄的小鸭或中鸭多发,发病以冬春潮湿季节多见。
病变
雏鸭或小鸭的败血型大肠杆菌病常与鸭疫里默氏杆菌病继发或混合感染。本病的解剖变化与鸭传染性浆膜炎极为相似,出现纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎。只是鸭传染性浆膜炎在病鸭肝脏上形成的纤维素性渗出物更干燥、较薄,更易剥离,而大肠杆菌形成的则相反,大肠杆菌病的肠道病变表现得更明显一些,并且产蛋鸭还表现坠卵性腹膜炎。母鸭的卵黄性腹膜炎主要发生在开产前的母鸭或正在产蛋的母鸭,其主要临诊症状及病理变化为:母鸭腹部膨大,拉白色带有蛋白碎片的粪便,剖检腹腔内充满蛋黄碎片或干酪样物。从患鸭的心血、肝、脾中容易分离到致病性大肠杆菌。
临床症状
本病多呈急性败血症经过,新出壳的雏鸭发病后体质软弱,合眼缩颈,腹围较大,常有下痢,多因败血症死亡;较大的雏鸭发病后精神委靡,食欲减退,两翅下垂,站立一旁,头向下弯曲,嘴角触地,两眼和鼻孔处常附黏分泌物,有的病鸭拉绿色稀便,呼吸困难,常因败血症或体质衰竭、脱水死亡;成年病鸭喜卧,不愿走动,站立时腹围膨大下垂呈企鹅状,触诊腹部有液体波动感,穿刺流腹水。剖检见肝脏肿大,呈青铜色或胆汁状的铜绿色、质脆;脾脏肿大,呈紫黑色斑纹状;卵巢出血,肺充血、出血和水肿;全身浆膜呈急性渗出性炎症,心包膜、肝被膜和气囊壁表面附有黄白色纤维素性渗出物;腹膜有渗出性炎症,腹水为淡黄色;肠道黏膜呈卡他性或坏死性炎症;有些病鸭卵黄破裂,腹腔内混有卵黄物质;有些雏鸭卵黄吸收不全,有脐炎等病理变化。确诊需送实验室做病原菌的分离与鉴定。
防治措施
1.加强鸭群的饲养管理,严格防疫卫生管理制度,从无大肠杆菌病的种鸭场引进种蛋或雏鸭。种蛋、孵化室和有关器具可用0.1%强力消毒灵或0.03%百毒杀液等消毒。日常可定期用牛至油预混剂按1.25克/100公斤饲料混饲,做好预防工作。
2.养鸭场可根据情况,接种多价大肠杆菌灭活苗。
治疗
肌肉注射国浩高科--杆浆金抗;未经免疫的雏鸭可用鸭浆膜炎-大肠杆菌高免血清进行预防和治疗。预防时,每只雏鸭皮下注射血清0.5毫升;治疗时,15日龄以下每只注射1毫升,15日龄以上每只注射2毫升,隔日再重复1次;成鸭0.5ml/kg体重,1次/天,重症连用2~3次,或遵医嘱。

獭兔球虫病与大肠杆菌病混合感染的冶疗


1发病情况

2007年8月,鹤壁市某獭兔繁育中心50日龄左右的獭兔,断奶后先后发生拉稀、腹胀,严重者因拉稀肚胀而死亡。病程1周左右,发病率为1%,用阿莫西林、环丙沙星、林可霉素等治疗有效,但不彻底。经问诊,该繁育中心幼兔防疫程序为:33日龄:兔瘟~巴氏杆菌~魏氏梭菌三联苗;38日龄:波氏杆菌~巴氏杆菌二联苗;43日龄:兔瘟单苗;48日龄:魏氏梭菌单苗。

2临床症状

幼兔发病初期食欲不好,精神沉郁,两眼无神。个别兔眼鼻分泌物增多,拉糊状稀粪,有的带胶冻状黏液,随后出现水样稀粪。有的腹泻与便秘交替,肛门周围有粪便污染。发病数日后腹围增大,食欲废绝,最后衰竭而死。病程约1周左右,死亡率达50%。

3剖检变化

剖检发现胃膨大、充满气体;十二指肠扩张、壁厚,肠道黏膜充血、出血,内有大量气体,个别肠段有半透明的胶冻样脓性物;胆囊扩张,囊壁稍肿,胆汁充盈、浓稠;肝周出血,且有灰白色不规则的坏死灶;肾盂出血;肺脏双侧均有出血。

4实验室诊断

4.1直接涂片镜检

用接种环取适量肠道内容物于载玻片上,加1~2滴0.85%的盐水稀释,用接种环充分拌匀,盖上玻片,在暗视野下用400倍镜检,发现大量的椭圆形、卵圆形卵囊,囊壁清晰,卵体内有一团球形原生质。

4.2细菌学检验

4.2.1分离培养

无菌取病死兔的肝、心血,按常规分别接种于普通营养琼脂和麦康凯培养基,于37℃恒温培养24小时,在麦康凯培养基上长出典型的粉红色菌落。

4.2.2染色镜检

挑取麦康凯培养基上典型的红色菌落,分别进行美蓝染色和革兰氏染色,油镜观察,美蓝染色可见两极浓染的小杆菌,革兰氏染色呈阴性。

4.3药敏试验

分别挑取普通营养琼脂和麦康凯培养基上的典型菌落,转接于普通营养板并涂抹均匀,放上药敏纸片,37℃恒温培养24小时后观察。结果发现阿米卡星的抑菌圈最大,头孢唑啉次之。

根据发病情况、临床症状、剖检变化和实验室检验,诊断为兔球虫病与大肠杆菌病混合感染。

5防治

建议采取综合防控措施,加强兔舍、笼具等的清洁卫生和消毒,及时隔离病兔,及时清理和处理粪便,严防污染饲料和饮水。

药物治疗:球虫病选择以地克珠利为主,痢特灵为辅的治疗方案;部分兔应用速康(以磺胺类成分为主)治疗均达到了理想效果。大肠杆菌病:按照药敏试验结果,选择使用敏感药物,病兔及时得以控制。

6小结

兔球虫病的发生有明显的季节性,主要发生在温暖潮湿的季节,6~8月高发。断奶后50日龄左右的幼兔对球虫病有较高的易感生,死亡率高达50%。

大肠杆菌属条件性致病菌,与环境卫生、饲养管理、动物健康状况等很多因素有关。通过对猪、鸡大肠杆菌病预防和控制经验来看,除采取综合防控措施外,在免疫程序中用相应血清型的大肠杆菌疫苗进行免疫是有一定效果。此外,必须结合药敏试验结果投药,切忌盲目用药,从而降低用药成本。

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