合浦珠母贝人工授精技术

一、诱导产卵法的人工授精。
1.精卵的收集
当产卵盆中的亲贝出现产卵行为时,即把它们移入玻璃中继续产卵或排精,待亲贝排卵完毕,把卵子和精子分别集中到玻璃中。

2.人工授精
人工授精容器通常为1000-2000mL的玻璃缸,在授精之前预先在受精缸中放入容积为三分之一的海水,然后把珍珠贝精、卵分别经过20号筛绢过滤,倒入受精缸中,并立即用玻璃棒轻轻的搅动,使精、卵充分混和而进行受精作用。

3.换水和洗卵
在人工授精的过程中,由于有大量的精子混杂在受精缸中,时间一长会影响水质。所以人工授精之后要进行多次换水,以便把多余的精子排出去。换水是根据珍珠贝的受精卵,在卵裂时下沉的特性,采用缸吸分层换水法。即用虹吸管把受精缸中的离底10mm以上的海水换到外面,再加进新鲜的海水。然后进行第二次,第三次换水,每两次换水的时间间隔为60分钟。

4.胚胎的筛选
胚胎发育约经4小时,部分的胚胎发育到囊胚期,由于胚体纤毛的摆动,胚胎上浮成云雾状。同时又存在胚胎发育不一致的现象,优质受精卵发育的胚胎第一批上浮,次质的受精卵发育成的胚胎于第二、三批上浮。为了保证幼虫的质量,通常要在第一批胚胎上浮时,及时将其吸到胚胎培养桶中进行胚胎的培养,以供人工育苗使用。而第二、三批上浮的胚胎一般不作人工育苗使用。

5.胚胎的培养
珍珠贝的胚胎是在600,000mL的塑料桶中进行培养的,培养时先把300,000mL的胚胎放桶中,然后加入同体积的海水,同时还加入抗生素抑制细菌,经16-18小时胚胎发育到直线铰合幼虫,也叫D型幼虫,这个时期的培养叫做胚胎培养。

二、解剖法采卵的人工授精。解剖法所采配子需在化学药物如氨海水的激发下,才能进行授精。
1.采卵子、精子
切断闭壳肌,打开左壳,剪去外套膜、足丝、鳃等,用脱脂棉擦去生殖腺周围的粘液,分开雌、雄贝,雌贝生殖腺颜色为黄色,雄贝为桔红色。用吸管分别吸取生殖腺的卵子和精子,分别放在小烧杯中。

2.人工授精
(1)直接授精法
将精子和卵子按1:4的比例直接倒入氨海水中进行受精。氨海水的]浓度为4010-5mol/L。

(2)改良的直接受精法
精卵混合在一起,放在氨海水中刺激5-6分钟,然后转到天然海水中进行受精,并于授精后一小时换水。

(3)间接受精法
精、卵分开各自在氨海水中刺激5-6分钟,然后把它们转到天然海水中进行受精,并于授精后一小时换水。

三、影响合浦珠母贝受精率高低的因素:
1.水温
受精和胚胎发育适温为25~30℃,最适水温27~29℃。

2.盐度
适宜盐度为20.00-24.00。

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合浦珠母贝人工育苗技术要点


1.水质
培养珠母贝用水必须洁净,无污染,同时水温和密度相对稳定。D型幼体最初移入有1/2海水的育苗池中,3天内逐渐加水,第4天开始换水,换水量随幼体的生长由1/3渐增至1/2,有条件也可长流水排换。幼体全都附着成苗后,可采用粗滤海水或沉淀海水换水,以增加天然饵料。为避免温差影响,换水工作宜在早晨进行,最好在上午9时前结束。

2.饵料生物必须及时喂饵料生物。早期以金藻为主,投放量为每毫升1000-1500个细胞,在缺乏金藻时,抽喂酵母片,投放量每立方水体0.3克。3天后增投扁藻,投放量为每毫升300-500个细胞。进入壳顶期,扁藻投放量增至每毫升500-1500个细胞;成熟期增至每毫升1500-2000个细胞;变态期增至每毫升2000-2500个细胞;附着后增至每毫升3000-3500个细胞。夜间要增加投喂量。

3.水温与密度。适温范围适温为25~30℃,最适水温27~29℃,适宜的密度范围1.018-1.025克/立方厘米,最适密度10.20-10.24克/立方厘米。

4.溶解氧。溶解氧要充足。含氧量每立方米水体必须在6克以上。

5.注意病虫防治。要把好过滤海水关,经常清洗水塔,清理过滤池,避免细菌、真菌及微生物随过滤海水流进育苗池。发现虫害应及时清除。

6.及时投放采苗器。当幼体20%-30%进入眼点期时,开始投放预先经过处理、洗净、消毒过的附着器于池底,第2、3天再投放垂吊附着器。

7.注意幼体生长、发育的观察。观察内容有二个方面:
其一,观察幼体的活动、摄食及数量变化和其他条件变化对幼体生存的影响;
其二,观测幼体生长及发育,及时增加投饵量及准备投放附着器等。

大珠母贝人工授精


1.诱导授精
可以用成熟度高并已进入排放阶段的亲贝,人为地改变生活的理化条件,促使生殖腺细胞排放,进行诱导产卵。在自然条件下,月相周期的变化,即在新月前后或满月期间,足够成熟的亲贝,一般都能排放生殖细胞。对蓄养中的大珠母贝亲贝,喂给充足的饲料,如含有高蛋白质的螺旋藻或蛋黄等。经过精心饲养后的大珠母贝亲贝,采取下列方法,在任何时候均可收到诱导受精的效果。

(1)物理方法。适当晒干或升高水温刺激亲贝,使雄性个体排精。在精液诱导下,雌性个体不久即可产卵。

(2)化学方法。可用氨水处理海水,刺激亲贝,使雄性个体排精,在精液诱导下,雌性个体很快便会排卵。

(3)生物方法。从大珠母贝或合浦珠母贝中吸取精液,注入亲贝蓄养池诱导大珠母贝雄性个体排精,然后用大珠母贝精液诱导雌性大珠母贝产卵。从诱导得到的精子和排出卵让它们在过滤海水中混合即能产生受精作用,过20分钟会出现第一极体,就可以开始洗卵。诱导授精的受精率极高,1个诱导受精的雌性亲贝,平常可培育出几千万个乃至2亿个以上的直线铰合幼虫。

2.解剖授精。
将挑选好的性成熟的亲贝,用开贝刀切断闭壳肌取出软体部,剪去外套膜、唇辨、足丝等,用过滤海水冲洗干净,用消毒棉花擦干,然后用消毒过的尖嘴吸管穿刺生殖腺表皮,细心抽取精、卵,分别置于盛有少量过滤海水的烧杯中。抽取精液时应避免在太阳光直接照射下操作,以免紫外线伤害精、卵。接着按1份精液、4份卵液的比例,先放卵后加精,在盛有2000毫升0.06~0.07%的氨海水容积为6升的玻璃缸中授精。随后以玻璃棒轻轻搅匀。受精适宜水温25~30℃,密度1.020~1.024克/立方厘米。

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