鸡球虫苗的研究进展

2020-10-09

鸡球虫病广泛分布于世界各地，是危害养鸡业的重要疾病之一。长期以来，本病的防治主要依赖药物，但由于耐药性虫株的出现、药物残留、研制新药成本高、周期长等问题的存在，使得人们开始重视球虫免疫预防方面的研究。利用虫苗控制鸡球虫病，在生产上已取得良好效果。

1 鸡球虫苗的种类目前，研制的球虫苗有强毒苗、弱毒苗和球虫基因工程苗等。世界上首创的第一个鸡球虫苗-Coccivac，为强毒虫株苗，野生型苗。接着在Vetech实验室生产出第二株毒力未改变的野生型苗Immucox。在欧洲，研制出弱毒苗Paracox和Livacox疫苗等。而基因工程苗则有研制成功的堆型艾美耳球虫的重组cSZ-1或cMZ-8蛋白质抗原苗，重组抗原GX5401，GX3262，S07，和P250等。

2 鸡球虫苗免疫的作用特点球虫病康复鸡对再感染有充分的抵抗力。只有活的、生长发育的球虫才能激发宿主产生保护性免疫，也就是球虫苗中需含有孢子化卵囊引发免疫感染，完成其生活史。死的卵囊不能诱发保护性反应。球虫的抗原提取物也能刺激机体产生保护性反应。鸡球虫免疫具有严格的种间特异性，一种球虫激发的免疫力，对其它种球虫的攻击没有交叉保护性，因此一种通用的球虫苗应该是多价的。球虫免疫感染本身对鸡的健康也有害，特别是难以使接种后的感染保持受控状态。所以要从接种方法如口服、饮水(加悬浮剂)、喷雾、涓滴免疫等作到均匀免疫，并且做好免疫后的卫生工作，及时注意垫料温度、湿度，使球虫感染处于受控状态，不致于使其再度发病。在使用球虫苗的前一个月不能使用抗球虫药，否则这些药物会中断球虫生活史，不能激发良好的保护性免疫力。

3 鸡球虫苗的研究概况人们很早就注意到球虫病康复鸡对球虫的再感染有高度抵抗力，然而球虫间不会激发免疫保护。Edgar50年代就研制出一种可供实用的球虫苗，从而拉开了免疫控制球虫病的序幕。

3．1 强毒虫株虫苗

3．1．1 作用特点这类苗的虫株是直接从自然发生球虫病的鸡体内或粪便中分离出来的，致病力强，在实验室传代，没机会接触到各种抗球虫药，为药物敏感株。它的免疫原理是球虫在低水平感染时不会使鸡发病，但球虫卵囊能循环地在鸡体内繁殖，并排出新的卵囊于垫料中，鸡从垫料中可获得再次免疫，经过3次生活史循环，鸡就可以产生较好的保护性免疫。

3．1．2 研制情况在美国和加拿大生产出2种毒力未改变的野生型苗，即Coccivac苗及Immucox苗(Vetech实验室)。Edgar创造出一种在卵囊使用上较经济的方法，即在4-10日龄通过饮水或饲料给鸡接种少量含有8种球虫的混合卵囊，通过鸡群繁殖后把子代卵囊播撒到垫草上，使鸡群反复感染而不断增强免疫力，这种首创混合卵囊球虫苗为Coccivac，1952年由DomandMitchel动物保健公司推向市场。

3．1．3 使用情况及存在缺陷 Cocivac在问世40多年没有被广泛使用，主要有两大缺陷，一是存在于虫苗中的各种球虫株都是完全致病性的；二是由于混入饮水或饲料中的卵囊分布不均匀，造成鸡群摄入卵囊量的不一致，结果有的鸡感染太轻，不足以产生免疫力，有的鸡摄入卵囊过多而引起发病。针对这些问题，首先要解决的是在饮水中加悬浮剂，随虫苗混合于水中，使虫苗在水中悬浮均匀。加拿大的李荣丰提出了凝胶接种体系，将虫苗均匀地分布于凝胶中让鸡采食，此即在美国和加拿大广为使用的鸡球虫苗Immucox，其虫苗内包含各主要虫种，用其免疫过的肉鸡增重、饲料报酬均超过Coccivac，且机体损伤较小。Davis等(1985)研制了藻酸盐颗粒强毒虫苗，将虫苗包裹于藻酸盐颗粒中，以防卵囊干燥，便于长期使用。这种虫苗的缺点是卵囊不能同粉料一起压成颗粒饲料，因为卵囊不能耐受压料时的高温，不过可将包有卵囊的藻酸盐颗粒直接投到食槽中。此外，还推出了饲料上喷苗技术，接种是在雏鸡孵出后的头3天内进行，这时鸡只在食盘或从容器中进食。用普通喷雾器将虫苗喷洒于饲料上，使所有的鸡都有接触虫苗的机会。强毒苗的免疫效果取决于接种卵囊的数量和接种的方式，Long观察到，每天给鸡投服1～20个感染性卵囊可使鸡获得对球虫病的免疫力。这种方法产生的免疫力超过一次投服大量卵囊或每周投服中等剂量卵囊所获得的免疫力。采用涓滴免疫，2周内连续免疫比1周内连续免疫产生了更佳的免疫保护性。

3．2 弱毒虫株虫苗由于活的强毒虫株虫苗未经致弱，如果免疫量不准确或免疫接种经鸡传代后卵囊的数量越来越多，有可能导致球虫病的爆发，因此，自从70年代起人们开始对致弱虫苗的研究，获得了一系列致弱球虫株。

3．2．1 致弱方法 ①通过对卵囊进行冷却、加热、超声、离子辐射等物理性处理，而使之减毒。但也有人怀疑这些处理可能是杀灭了部分卵囊使实际接种的卵囊数量减少，并不是降低了球虫的致病性；②通过鸡胚传代致弱。将球虫子孢子接种到鸡胚绒毛尿囊膜上培养，连续传代多次后获得对鸡致病性低，但仍保持良好免疫原性的鸡胚适应株，其中只有柔嫩、和缓、布氏、毒害艾美耳球虫可进行鸡胚传代，其它5种不能在鸡胚内完成内生性发育；⑧早熟选育减毒。每种鸡球虫都有相对固定的发育周期，即潜隐期，经过多次选择最早成熟的卵囊反复传代后，潜隐期会逐渐缩短，成为所谓的早熟虫株，早熟虫株在发育周期逐渐缩短的同时，致病力相应下降，但能保持良好的免疫原性，而且早熟特性和弱毒特性相当稳定，经多次不作早熟选育进行反复传代后也没有恢复现象。它的早熟特性是由遗传基因决定的。

3．2．2 研制情况在60～70年代，采用辐射致弱球虫，随辐射剂量增加，对宿主的致病作用随之降低。Jenkins等发现用15Krad-X射线和12Krad-射线分别辐射处理堆型和巨型艾美耳球虫卵囊，毒力都明显下降，这些卵囊的子孢子可以正常侵入肠上皮细胞，但裂殖生殖阶段的发育几乎完全终止。用辐射减毒的卵囊接种仍然可以诱导宿主产生保护性免疫反应。Young研究了60Co-7射线对4种球虫(堆型、布氏、巨型、柔嫩)及其后代的影响，用SPF鸡进行了致病性和免疫原性试验，结果发现第3代艾美耳球虫的致病性比辐照当代更为严重，其免疫原性比后者更强，因此辐照后的球虫随鸡代数的增加，其致病性将会恢复。吴兆敏，等用化学诱变剂NTG处理柔嫩艾美耳球虫卵囊，在毒力下降的同时卵囊繁殖力也下降，可能存在与物理学减毒同样的问题。 1972年Long首次用鸡胚传代的方法培育出柔嫩艾美耳球虫致弱虫株，其致病力的减弱是由于第2代裂殖体从原来的黏膜固有层转而全部寄生在肠腺上皮细胞的缘故，不引起出血，对组织损伤小，以此致弱虫株免疫的鸡对毒力株的攻击有良好的保护作用。但Long发现鸡胚传代致弱方法有4大缺点：①致弱性能相对不稳定，当转为鸡传代时毒力返强快；②通过鸡胚生产大量商品化致弱虫株的卵囊比较困难；⑧随鸡胚传代次数的增加，虫体的免疫原性就会减少或丧失，实际上难以获得既保持良好的免疫力，又使毒力较弱的最佳组合，④最主要的局限性在于流行最广的巨型、堆型和早熟艾美耳球虫不能在鸡胚内发育，毒力较强的布氏艾美耳球虫虽然可以在鸡胚内发育，但卵囊生长不良，因此通过鸡胚传代生产全价致弱虫苗就受到了限制。 1975年Jeffers采用挑选早熟卵囊的方法选育出了柔嫩艾美耳球虫致弱虫株，其致病力的减弱是由于第2代裂殖体没有完全分化或者在成熟时变得非常小。这种方法不仅适用于各种球虫，而且选育的虫株具有遗传稳定性，例如早熟柔嫩艾美耳球虫2株经25代延时收取的卵囊毒力不返强。Jeffers断言，用这些致弱虫株制成球虫苗能够诱导鸡体产生免疫力，同时对鸡保持无害。当然这种选育方法也不是无限地缩短潜隐期，否则随着致病力的下降，免疫原性也就消失了。Jeffers选育的Wis-F-125虫株在致病力降低的同时保持了较好的免疫原性，而Wis-F-96虫株则几乎丧失了免疫原性，这可能是由于缺乏第2代裂殖生殖-重要的抗原成分的缘故，因此早熟致弱虫株的选育确系一种致弱的毒力和良好的免疫原性的最佳组合。我国有研究工作者在剖杀鸡时偶然取得盲肠内的早熟卵囊，结果已丧失免疫原性。英国HoughtonLab经过10多年的研究，研制出由7种早熟致弱虫株组成的球虫苗Paracox，1992年在英国、荷兰和爱尔兰上市。但早熟苗对球虫感染所产生的病理作用减轻或消除，并不意味着虫苗对其感染诱导产生绝对的免疫保护。这种虫苗只能防止发病，而不是抵抗感染，尽管用苗后鸡群仍有卵囊排出，但鸡群的球虫病确实得到预防和控制。

3．3 球虫基因工程苗在球虫卵囊疫苗取得成功的同时，人们又转向了球虫基因工程苗的研究，尝试用纯化的抗原来免疫鸡以求得保护。

3．3．1 研制机理采用杂交瘤技术和遗传工程技术，生产出球虫的保护性抗原给鸡免疫接种后，使其产生相应的免疫保护力。这类苗的研究首先应鉴定保护性抗原，早期的研究认为第二代裂殖体在诱导保护性免疫方面起重要作用，而有性阶段似乎不能诱导免疫。球虫生活史的不同阶段存在着共同抗原，且子孢子抗原在抗球虫的保护方面起重要作用，但人们认为球虫的免疫机制主要是局部分泌抗体和细胞介导的免疫，基因工程技术的一个重要目标就是寻找和生产保护性抗原。目前对免疫应答的精确机制尚不清楚。

3．3．2 研究情况应用杂交瘤技术产生抗球虫的单克隆抗体来鉴定球虫抗原已取得成功。Garler(1982)用杂交瘤技术已研制出防治家禽球虫病的亚单位苗。Danforth(1986)首次研制成功球虫病重组苗，即从大肠杆菌中提取了柔嫩艾美耳球虫的抗原(命名为5401)，用5401免疫鸡后用同种卵囊攻击，在体增重、饲料转化率等方面明显地优于对照组，与堆型艾美耳球虫无交叉反应。艾美耳属球虫cDNAs抗原已被描述，并且使用这种抗原的免疫试验正在进行。如5401，GX3262等。Miller等研制球虫苗的侯选抗原，cDNA克隆来自于孢子化卵囊编码虫体抗原的基因，所用抗体为针对堆型艾美耳球虫子孢子的单克隆抗体12-09。将含有球虫抗原的cDNA片段克隆到gtll噬菌体转化给质粒，再导人大肠杆菌，含有该质粒的菌株表达了GX3262。MarckSharp实验室的研究人员将柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊分离的子孢子经超声波处理，再用Zwittergent3-10提取，粗提物通过S-200层析分离，分离成分用于鸡的免疫试验，鉴定出保护性抗原成分。在另一项研究中，使用重组Cheys07抗原免疫鸡，对4种不同的艾美耳球虫产生了部分保护。研究表明，不完全保护是细胞介导免疫机制的结果。家禽艾美耳球虫的细胞介导免疫中，种间交叉免疫的缺乏并非起因于交叉反应T细胞的缺乏(Prowse等1991)。

3．3．3 使用情况及免疫接种抗原的运用与免疫方式的选择有关。用辅以佐剂的CMZ-8抗原或大肠杆菌表达之后未经处理的CMZ-8抗原免疫时，对活球虫的攻击仅产生部分保护。用CMZ-8蛋白质的肠道外途径免疫鸡比经口免疫的鸡激发更高滴度的抗体和更强的T细胞反应。用携带有CMZ-8基因的活大肠杆菌转化体经口免疫，在鸡的部分品种中诱发的局部免疫更为有效，而其他品种中肠道外途径接种好。相关结论为，肠外途径接种，尽管能产生循环抗体，但对肠道球虫来说，T淋巴细胞介导的免疫作用更大些，而经口腔接种，则肠黏膜对这种死抗原是否会产生免疫应答又是一个尚需探讨的问题。目前，人们一直在努力开发重组苗(基因工程亚单位苗)，但是难以转入实用阶段。许多学者竟相探索球虫免疫保护的实质、有关球虫分子学鉴定及产生保护性反应的免疫方法。利用基因工程技术对球虫感染和免疫的基本性质的理解已经取得了进步，但离制作基因工程苗的目标还很遥远。基因工程是一项耗资、耗力、耗时巨大的工程。而且需要明确的理论作为指导，基因工程苗免疫虽还需要大量研究，不过这已是一种趋势。

4 展望大量的研究试验及生产实践都已证明，通过虫苗预防球虫病是可行的，国外已有数种商品化球虫苗上市供应，并在许多养鸡业先进的国家获得广泛应用，但在我国的应用已远远落后了。在我国推广使用球虫苗存在如下问题：①人们对球虫苗的认识和接受问题；②球虫苗的合法化生产问题，③球虫苗的规模化生产问题；④球虫虫苗的推广使用技术问题。当这些问题解决同时，虫苗预防将会逐渐发展为防治鸡球虫病的主要手段。鸡球虫苗的大量推广使用，尤其是基因工程苗的研制成功，将为养鸡业的发展带来显著的经济效益、社会效益和生态效益。

相关知识

中草药防治鸡球虫病的研究进展

鸡球虫病是危害养鸡业最严重的寄生虫病之一，目前，虽然国内外专家学者对球虫病疫苗的研究有了一定进展，但在短期内还难以推广应用，临床上仍然以药物预防为主。应用防治鸡球虫病的西药在发病初期能够迅速控制病情，但是，长时间应用极易产生耐药性，且具有毒副作用大、药物残留高等缺点。近些年来，应用中草药防治鸡球虫病的砑究取得了一定进展，证明中草药具有长时间应用不易产生耐药性、毒副作用小且具有促进机体生长等优点。

1 用以防治鸡球虫病的中草药及复方制剂

1．1 驱虫类是指能够直接杀死虫体或抑制虫卵、虫体生长发育的一类药物，是防治鸡球虫病的常用药物。较为常用的药物有：常山、鸦胆子、仙鹤草根芽、苦楝皮、百部、冰片、雄黄等药物，其中以常山最为常用。

1．2 清热燥湿类球虫病在临床上按中兽医学辨证原则为湿证，治疗上以清热燥湿为主，故清热燥湿类药物也是治疗鸡球虫病的常用药物。较为常用的药物有：黄芩、黄连、黄柏、白头翁、秦皮、苦参等药物。

1．3 清热解毒类具有清热、解毒、利湿的药物，临床上用以对症治疗。较为常用的药物有：青蒿、马齿苋、柴胡、白茅根、蒲公英、地锦草、穿心莲、败酱草等药物。

1．4 补益气血类用以提高机体抵抗力、增强机体杀虫、驱虫作用的一类药物。较为常用的药物有：党参、黄芪、当归、熟地等。

1．5 常用的复方制剂目前，复方制剂仍然以临床验证为主，较为常用药物有：球虫净(常山200g，柴胡60g，加水400ml，煎至250m1)、驱球散[：](常山2500g，柴胡900g，苦参1 850g，青蒿1 000g，地榆炭900g，白茅根900g)、白头翁苦参散(白头翁、苦参、鸦胆子各等份)、五草汤(旱莲草、地锦草、鸭跖草、败酱草、翻白草各等份)、藿香正气散(藿香80g，紫苏50g，大腹皮80g，茯苓l00g，白芷60g，陈皮50g，白术60g，厚朴60g，常山l00g，地榆80g，玄参50g，地锦草l00g，白茅根(鲜)800g)，其他还有球康、敌球灵、净球散、球消散等复方制剂。

2 中草药防治鸡球虫病的机理研究

2．1 杀虫、抑虫作用中草药具有直接杀死虫体或抑制虫体、虫卵的作用。宋世英等在21日龄雏鸡饲料中分别添加0．5、1．0、2．0、4．0g／kg饲料常山粉并人工感染艾美尔球虫属的不同球虫卵囊混合感染，结果，不同剂量常山组对鸡球虫均有良好地预防效果。以2．0g、4．0g／kg常山组成绩指数高于健康对照组和氯苯胍组，常山组对柔嫩艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、堆型艾美尔球虫、变位艾美尔球虫均有较强的抑制作用，常山组存活率、增重率和成绩指数与感染不投药组差异显著。王新等在15日龄肉仔鸡日粮口添加1％的净球散具有良好的抗球虫效果，抗球虫指数显著高于氯苯胍组，50％、100％净球散煎剂显著抑制柔嫩艾美尔球虫卵囊的孢子化率。

2．2 增强机体的免疫力：部分中草药能够显著提高机体的非特异性免疫力和特异性免疫力。樊福好等用黄芪多糖给1日龄艾维因仔鸡肌肉注射1ml只／次，结果，可极显著提高球虫感染鸡的淋巴细胞玫瑰花环(EFC)形成率(P0．01)。极显著提高球虫感染鸡的红细胞免疫复合物酵母花环形成率(P0．01)。极显著提高球虫感染鸡的刺激指数(LT率)(P0．01)。并提高健康鸡的C3b受体花环形成率。

2．3 缓解临床症状：部分中草药能够缓解球虫病感染鸡的临床症状。如柴胡、白头翁等药物的解热作用，马齿笕、苦参等药物的止痢作用，地榆炭、仙鹤草等药物的止血作用等。

3 中草药防治鸡球虫病的临床应用

聂奎等对无球虫雏鸡人工接种艾美尔球虫?昆合卵囊，用中药球康I(党参、黄芪、白术、当归、熟地、常山、青蒿、柴胡、甘草)、球康II(黄芪、白头翁、苍术、乌梅、苦参，黄柏、地榆、白茅、薏仁)与AC-1、杜球进行了疗效比较，结果球康I组、球康Ⅱ组AC-1组、杜球组雏鸡存活率分别为90％、100％、100％、95％；抗球虫指数分别为123．6、179．7、190．9、187；而接种不给药组存活率为0，抗球虫指数为50．5。表明中药球康在强毒卵囊攻击后表现出较好的防治效果。刘永举等用常山、柴胡、青蒿、大黄等中药煎剂给1日龄罗曼肉用公雏饮水并将药渣拌料饲喂，人工感染柔嫩艾美尔球虫卵囊，结果，各给药组(1．0％、1．5％、2．0％)能极显著提高雏鸡存活率(P0．01)；病变值有显著差异(P0．05)；卵囊值较感染不给药组差异显著(P0．05)；1．5％、2．0％组抗球虫指数差异极显著(P0．01)。林勇等用中药制剂(丁香叶400g，丁香叶浸膏200g，黄芪20g，半枝莲10g混匀、粉碎)添如于72-86日龄蛋雏鸡日粮中，结果，发病雏鸡治愈率为93．7％，停药3天内复发率为0；摩能霉素组、鸡宝20组治愈率分别为舛．1％、93％，停药3天内复发率分别为33％、41％；未发病鸡用中药预防，有效率100％，无一例发病。胡孝忠等于10日雏鸡日粮中添加纯中药制剂原虫散，剂量分别为0．25、1．0、3．0g／kg体重／天，结果，三个组均有强大的抗球虫作用，抗球虫指数分别为169．3、163．22、168．15，且未出现任何不良反应。梁纪兰等在15-18日龄公雏日粮中添加纯中药复方制剂敌球灵(岗梅、地榆等中药组成)，人工感染柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊，以存活率、相对增重率、平均病变值、卵囊值、抗球虫指数进行判定，结果证明敌球灵具有强大的抗球虫作用。

4 中草药防治鸡球虫病的前景展望

由于使用化学药物防治鸡球虫极易使球虫产生耐药物残留高，影响人类健康，而疫苗免疫目前还不成熟，而中草药制剂具有毒副作用小、药物残留低、不易产生耐药性等优点且能够增强机体抵抗力，促进机体生长等作用，因此，中草药防治鸡球虫病有着广阔的前景，随着中草药防治鸡球虫病的研究的进一步深入，开发出高效、质优价廉、使用方便的中草药制剂，必将为鸡球虫病的防治和养鸡业的发展作出巨大贡献。

火鸡出血性肠炎病毒分子生物学研究进展

火鸡出血性肠炎(Hemorrhagic Enteritis HE)自Pomeroy和Fenstermacher最先在美国报道以来，已有60多年的历史，但至今仍是遍及世界火鸡养殖地区的一种急性传染病。该病是由火鸡出血性肠炎病毒引起的，它主要感染四周龄或较老龄的火鸡，以火鸡沉郁，脾肿大，出血性肠炎，免疫抑制等为典型特征，可经口腔或泄殖腔感染，但没有经卵传染本病的报道。自然感染的死亡率随火鸡年龄和饲养管理条件而不同，由10％到60％，实验感染的死亡率可高达80％，给经济养禽业带来严重的损失，据估计美国各州每年因本病造成的损失竟达3百万美元以上，已引起人们极大的关注。国外对该病的研究比较多，且随着分子生物学的迅速发展，该病毒在病毒分子学领域的研究也已取得了较大的进展。国内对该病的研究和报道还很少见。本文就国外对HEV的生物学特性、基因组结构、病毒编码蛋白及其功能等方面研究作一综述。

1 火鸡出血性肠炎病毒生物学特征火鸡出血性肠炎病毒(Hemorrhagi Enteritis Virus，HEV)是引起火鸡出血性肠炎的病原体。它连同雉鸡大理石纹脾病病毒(MSOV)，鸡大脾病病毒(ASSV)同属腺病毒科，禽腺病毒属1群中的成员。在血清学方面它们与禽腺病毒I和Ⅲ群成员有严格的区别。病毒粒子呈二十面体对称，无囊膜，为裸露的线形双股DNA。直径约为72nm。SureshM等用DNA杂交技术和PCP,扩增技术研究表明HEV的复制主要集中在脾脏中的B淋巴细胞和巨噬细胞，产生大量的IgM，而不能在CD4+和CD8+T淋巴细胞中繁殖，这点HEV与哺乳动物腺病毒完全不同(哺乳动物腺病毒能感染T淋巴细胞并在其中繁殖)。据RautenschleinS报道其繁殖的速度与宿主脾脏细胞凋亡的速度呈正相关。HEV在感染的细胞浆中相当稳定，对乙醚、氯仿有抵抗力，但在丙酮中不稳定，对酸碱度及温度的耐受范围较宽。

2 HEV的基因组结构 HEV的基因组全长为26 263bp，是目前已知腺病毒中最短的一个。其G+C含量为34。93％。在其基因结构中起始密码为甲硫氨酸，编码容量大于100个氨基酸的开放阅读框架(ORF)有八个，编码50～100个氨基酸的ORF，上链有16个，下链有21个。 HEV的末端倒置重复序列(ITR)有39个碱基对，这与其它腺病毒相比要短许多。在人腺病毒9～18位碱基对之间有TTAT保守序列，是病毒复制的起始点。HEV在该区域与人腺病毒具有高度的保守性，只是缺失了第12位上的腺嘌呤。末端前体蛋白(PTP)和DNA聚合酶(POL)复合物在此处与之相连。第19位一39位之间为B区，含GGGAGG序列，SPl转录因子可能与该序列相互连接并促进病毒DNA复制的快速有效启动。腺病毒基因组由早期转录单位和晚期转录单位组成。早期转录单位(E1～E4)与病毒DNA复制、代谢和调节有关。其中El、E4是病毒生长必需区，对病毒复制、转化和关闭宿主蛋白合成起重要作用。HEV的E1区和E4区与其它的腺病毒很不相同，它由二簇开放阅读框架构成。对应El区的有ORFl、2、3、4．对应E4区的有ORF7、8。鸡胚致死孤儿病毒(CELO)的El区与HEV的n区很相似。从CELO能够诱导小仓鼠形成肿瘤可以知道，CELO的ORF中分布着El区的一些编码基因，在这一方面HEV很可能与之相似。与其它腺病毒相同，HEV的E2基因产物直接涉及病毒DNA复制和转录调节。其中，E2A区主要编码DNA结合蛋白(DBP)，E2B区编码末端前体蛋白(PTP)和DNA多聚酶(POL)。HEV的E3区是一个900bp的开放阅读框架。与其它的腺病毒相同，该区位于HEV的PVI和纤维蛋白之间。在此区中不同的腺病毒编码各种大小不同的蛋白产物。由于该区是腺病毒生长非必需区，缺失或取代E3区的腺病毒在细胞上仍能生长，因而人们常在该区插入外源基因构建重组腺病毒。 HEV的晚期转录单位(L1-L5)与其它腺病毒相同，主要编码病毒结构蛋白和部分晚期调节蛋白，是装配成成熟病毒粒子所必需的。HEV的RNA转录物主要起始于晚期启动子(MLP)，根据剪切方式及终止位点的不同，分成5组，分别为：L1(52k，Ⅲa)、L2(五邻体，CPl，CP2)、L3　(PVI，六邻体，内肽酶)、L4(100k，33k，P)、L5(纤维蛋白)。在腺病毒感染期间，也有病毒蛋白的合成，它们主要是PVI和N2中期基因，HEV与其它禽腺病毒一样无PVI基因，Ⅳ2基因比其它腺病毒要短，能促进主要晚期启动子的表达。

3 病毒蛋白的结构与功能

3．1 E1区编码蛋白 HEV无明显的Ela、Eib区，HEV在该区的编码蛋白可能就分布在ORFs中。这些蛋白与细胞凋亡有关。

3．2 病毒晚期结构蛋白对HEV晚期结构蛋白的研究尚未完全弄清，该文就其中较为清楚的晚期蛋白做一叙述。

3．2．1 五邻体土2个五邻体颗粒分别位于病毒20面体的顶上。五邻体由基部和由基部向外伸出的纤丝组成。HEV每个五邻体有一条纤维突起，这与EDSV不同，EDSV每个五邻体有二条纤维。在许多的人腺病毒中，有一个共同的三肽序列，即Arg／Gly／Asp(RGD)，该序列是病毒与宿主细胞连接整合的位点，并引起细胞对病毒的内吞作用。HEV的五邻体基座上无RGD序列，因而，HEV可能不是通过与宿主细胞上的。V整合进宿主的。进一步的序列分析揭示五邻体基座上的Leu-Asp-Va[(LDV)氨基酸序列与人腺病毒是一致的。纤维蛋白上的LDV基元通常与宿主淋巴细胞和巨噬细胞上的04p1相互连接整合。HEV五邻体基座上的LDV序列预示了其可能就是通过该序列与Q4p1整合进宿主细胞。

3．2．2 核心蛋白 JuckerMT等用DNA杂交技术对HEV基因作图谱分析发现HEV的核心蛋白分别对应于人腺病毒的Pv蛋白、mu蛋白和PVII蛋白，位于六邻体和PVI之间。核心蛋白1具有丰富的Arg／Pro／tMa．这可能与它在DNA的装配中充当DNA结合蛋白有关。

3．2．3 PVI HEV的PVI大小与其它的腺病毒的基本相同。在蛋白的两个末端具有相同的两个切割位点。在PVI N端约30位的I型内肽酶切点(L，M，I)XGG'X和位于其C端的II型内肽酶切点高度保守，后者的切割将产生长为11肽的巯基内肽酶辅助因子。PVI-11肽中的半胱氨酸对二聚体的形成和巯基内肽酶的激活是必需的。

3．2．4 六邻体 HEV的六邻体蛋白大小约100kDa。由于它是构成病毒衣壳的主要蛋白，它的大小对病毒的大小起着决定性的作用。六邻体与其它的蛋白相连，它的氨基酸序列在决定腺病毒不同型与群表面特异性抗原方面起着非常重要的作用。基于这点，早在1993年，vandenHurk JV等人就用HEV六邻体制备的单克隆抗体免疫火鸡，结果得到很好的保护。同时，他们也发现，用非天然的六邻体蛋白来免疫火鸡并不能产生相应抗体，从而可以看出六邻体的天然构象对其免疫的重要性。继后，CardonaCJ等(2001，1999)[n-12-]将HEV六邻体基因及构成它的100kDa折叠蛋白基因与鸡痘病毒进行整合并表达，并用其表达的产物来免疫火鸡，结果发现其体内含有高滴度的病毒抗体。用此法制备的重组疫苗不仅能够产生很好的免疫力，且无常规疫苗接种后所产生的免疫抑制现象。

3．2．5 病毒蛋白酶与其它腺病毒相比，HEV蛋白酶的C末端比其它的腺病毒多了几个氨基酸。不同的腺病毒，其蛋白酶氨基酸序列在一些区域具有保守性。在人腺病毒的蛋白酶中有三个氨基酸构成酶的活性中心，即His54，Glu71，Cysl22．HEV的活性中心与之相似，只是Asp取代了Glu71。在活性中心以外的区域也高度保守，这可能在稳定活性中心是必需的。该酶是所有腺病毒中最保守的蛋白，它主要切割病毒蛋白的(M，L，1)XGXG和(M，L，1)XGGX位点，对病毒粒子的成熟和感染力至关重要。

3．2．6 纤维蛋白 HEV的五邻体基座上只有一个纤维蛋白，其长度比其它的腺病毒要短，约有17nm。从其N端至C端依次排列着蛋白纤维三个典型的结构域，即尾区，柄区，顶端球区。它的作用主要是识别细胞上的特异受体，从而使病毒与宿主细胞特异的结合。

3．3 E2区蛋白 E2区主要包括以下几种蛋白。

3．3．1 末端前体蛋白(pTP) I-lEV的pTP有597个氨基酸，由严形成成熟蛋白须在蛋白的第169和297位点进行切割，该切割位点与鸡减蛋综合征病毒(EDSV)接近，为第156和265氨基酸。该蛋白的功能主要是在病毒复制起始中充当引物并促进病毒编码的DNA多聚酶的核定位。

3． 3．2 DNA多聚酶(POL) HEV的POL无论在大小和氨基酸序列方面都与其它腺病毒相似。LPutcovshc：]对其蛋白进行分析发现，其925-933氨基酸残基序列与DNA多聚酶B家族相同。

3．4 DNA结合蛋白(DBP) HEV 的DBP位于负链内在蛋白与100kb基因之间，大小约345个氨基酸残基，比其它的腺病毒要小。它的C末端与其它的腺病毒具有高度的同一性。它与病毒DNA结合并启动晚期启动子进行复制。此外，在核的定位及转录和转录后水平调控中也发挥着重要的作用。

3．5 lVaII 是病毒中期表达蛋白，它对病毒晚期基因的表达起着重要的调节作用。

3．6 E3区和E4区 HEV的E3区编码的蛋白产物与OAV的E3区编码产物具有低相似性。E3区与E4区分别编码具有调控作用和与宿主细胞成分紧密相连的蛋白质，由于腺病毒具有对宿主的选择性，因而在这些区域所编码的蛋白也具有选择性，但作用可能都相似，如E3区基因产物主要与抵抗宿主免疫作用有关，E4区编码产物主要是促进病毒的复制，增强病毒晚期基因的表达，并抑制宿主基因的表达。然而到目前为止，人们还不太清楚其准确定位。

4 　HEV与其它腺病毒的关系腺病毒的分类中有三个参数对其分类地位起着关键性的作用，它们分别是反向末端重复系列(1TR)，G+C百分含量和病毒DNA的长度。我们已知HEV含有26 263bp，是目前所知道最短的腺病毒。G-PC百分含量为34．93％，比其它禽腺病毒低。EDSV的G+C百分含量为42．5％，CELO为54，3％，人腺病毒百分含量在48％～59之间，羊腺病毒(OAV)的Gq-C百分含量与之接近为33．6％。HEV的ITR含39bp，在人腺病毒中相同的亚属ITR的大小相似。通过与其它腺病毒相比发现，如果按以往腺病毒分类情况来看，HEV无论从结构基因的大小，ITR长度还是Gq-C百分含量都与哺乳动物腺病毒OAV非常的相近，OAV的长度为29 544bp，G+C百分含量为33．6％，ITR有46bp。而与禽腺病毒却相隔较远。另外，从它们的基因组结构与序列来分析比较也发现，HEV与OAV腺病毒的关系比较近，这样的矛盾引发我们不得不去想，哺乳动物腺病毒与禽腺病毒的分类是否要作重新的修改。

5 HEV分子病毒学研究的意义与前景近年来，随着对腺病毒研究的不断深入，尤其在动物腺病毒方面，由于其具有与人腺病毒类似的基因组结构，能转染人的细胞，具备将外源基因转移到人细胞内的能力，却不能在人细胞内复制，有较高的安全性，已引起人们高度的重视。HEV作为禽腺病毒中的一员，从分子病毒学角度对其基因组进行分析，从而使人们更加清楚其致病机理，且为寻找保护性抗原制作活载体疫苗提供理论依据，以弥补现有疫苗免疫后出现的抑制现象。又由于HEV除能感染其天然宿主火鸡外，还能感染雏鸡，因而，它也可以作为鸡的活载体，在鸡体内表达鸡病毒保护性抗原为构建鸡疫苗提供新的思路。总之，这所有的一切都有待于人们对HEV基因组的进一步了解，以获得更大片段的非必需区供外源基因插入，为多价基因工程活载体疫苗的构建奠定基础，同时HEV基因组的结构与功能的探索，又为基因治疗提供清晰的分子生物学背景。相信在不久的将来，HEV分子病毒学研究必将会有新的突破和广泛应用。

禽传染性支气管炎诊断与防治技术研究进展

禽传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒科的禽传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病，以呼吸道症状、产蛋下降、肾脏病变等为特征。自1988年以来，出在我国大部分地区相继流行，其发病率100％，死亡率10％～30％。国内每年由此病造成的经济损失超过10亿元。在规模化饲养条件下，IB感染率更高，病型更加复杂，防治难度更大，危害更加剧烈。因此，IB的诊断防治已成为禽病科研的热点和难点。 IBV为冠状病毒科冠状病毒属的代表种，病毒粒子直径85～130nm，有囊膜，属于RNA病毒；对动物的红细胞无凝集性，但经胰酶、I型磷酸酯酶C等处理后可凝集鸡红细胞；可适应于鸡胚、鸡胚气管环、鸡胚肾细胞等多种细胞培养物生长；能够刺激动物机体产生体液免疫和细胞免疫。IBV病毒易发生变异，至今全世界分离的毒株至少30个以上血清型和更多的变异型。国内外Gough等(1992)、Kwon等(1993)、王红宁等(1997)、Igniatovic等(1997) 对病毒的分型进行了研究，但目前还没有统一的分型方法。不同血清型甚至不同毒株之间交叉免疫保护率低，给本病的诊断和防治带来了很大的困难。 1992-2000年王红宁、甘孟侯、王林川、刘兴友等对禽传染性支气管炎(新变型)综合防治进行了详细研究，在IB的病原学及流行病学、病原分子生物学、检测方法、新疫苗及综合防制技术等方面的研究，取得了系列成果。我国王玉东、朱国强、江国托、李康然、杨汉春、廖明、陈福勇等也对IB进行了研究。目前建立并推广实用的诊断技术，研制完善IB疫苗，仍是本病的研究重点。本文就IB诊断防治技术的进展综述如下。

1 诊断技术进展

主要根据临床症状、病理变化、病毒分离和对鸡胚致病性等进行综合诊断，目前发展较快的诊断方法主要有血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。

1．1 血清学诊断技术自1931年发现IB至90年代初，主要采用血清中和试验(鸡胚气管环培养观测纤毛运动情况)、琼脂扩散试验、血凝和血凝抑制试验等常规血清学技术对IB进行诊断。血清中和试验可用于检测IBV抗体、抗原及分型，虽然方法简易，但费时较长。琼脂扩散试验用于检测IBV抗体操作简便，但敏感度不高，不适用于免疫后抗体的检测。血凝与血凝抑制试验可用于检测IBV抗原及抗体，但用不同毒株制成的HI抗原检测抗体时，抗体水平参差不齐。反向间接血凝试验(RIHA)可用于检测IBV抗原，但可靠性不及中和试验。在以上方法研究的基础上，王红宁、刘兴友、王乐元等对IB的检测技术进行了系统研究，建立了3种新的血清学检测方法。王红宁等(1996)在国内首先采用对流免疫电泳技术对128份人工感染鸡样品进行检测，该方法简便，具有较高的敏感性和准确性，生产场可用此方法进行IB的免疫监测。刘兴友等(1997)建立了胰酶分散抗原间接荧光抗体法，该方法具有良好的特异性，检测程序简单，检测抗原的时间短，适合于制备大批量抗原用于临床检测或抗体监测。王乐元等(1993)首次成功地建立了检测IBV抗原的间接Dot-ELISA，对IBV抗原的最低检出量为1．36 g／ml，可以作为疫病早期诊断的依据和进行流行病学调查。陈福勇等(2002)将IBVN基因在大肠杆菌中表达，表达产物N蛋白作为ELISA诊断抗原，可用于IBV抗体检测。

1．2 分子生物学诊断技术

1．2．1 反转录多聚酶链式反应(RT-PCR) RT-PCR技术用于IB诊断使诊断技术提高到基因水平。RT-PCR具有简便、快速和敏感性、特异性强的优点。Jackwook(1992)提取了分属于5个血清型的8株IBV的RNA，将其反转录成DNA后，用PCR扩增，然后用一生物素标记的探针进行斑点杂交，结果这8株病毒均被检出。王林川等(1992)率先在我国采用RT-PCR技术检测了广东分离的IBV。黄勇、王红宁等对四川分离的多株IBV S1基因和N基因用RT-PCR进行了扩增，结果证明RT-PCR检测方法具有敏感、特异、快速等特点，适用于不同来源及不同血清型IBV的检测。

1．2．2 核酸探针技术核酸探针技术具有很高的敏感性。Kwon(1993)将此法同电镜(EM)观察病毒方法进行了比较，发现此法敏感度比EM高。刘苹、王红宁等(1997)用地高辛标记IBV标准强毒株M41的S1基因，将标记的S1基因探针与12株IBV病毒的RNA提取物进行斑点杂交，结果该探针与12株已知IBV毒株均成阳性反应，而与NDV、IBDV、ILTV、正常胚液、蒸馏水对照均成阴性。该探针的检测灵敏度为9．77 fg，杂交灵敏度为24．41 pg，具有很高的敏感性。

1. 2．3 限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP) 这是一种通过病毒基因限制性酶切图谱进行分型的方法，该法新颖，重复性好，可用于IBV从分子水平上进行了分型。Kwon等(1993)对IBV S1基因的RT-PCR扩增产物，经限制性内切酶消化后电泳，根据电泳图谱对25株IBV进行了分类，结果得到了与中和试验相一致的结论。黄勇等(1996)、王林川等(1997)、磨美兰等(2001)、Jackwood(1997)等人均用限制性酶切片段长度多态性分析对IBV进行了分型研究。

1．2．4 寡核苷酸指纹图谱分析主要用于IBV的流行病学调查，可区分新的变异株是由当地株突变而来，还是从外地传人的。尽管该法重复性好、灵敏，可以区分同一血清型不同突变株之间的差异。但该法只有用于基因序列同源率在95％以上时才有价值。Butcher等(1990)利用此法对DPI毒株10代、100代鸡胚传代物：T株、Mu株进行了分析，结果发现这4种图谱都有差别。该法一般应与其他方法相结合来进行IBV的诊断。分子生物学诊断方法快速、灵敏，克服了传统血清学诊断方法的许多不足之处。RFLP主要用于IBV的分型研究，寡核苷酸指纹图谱分析可用于IB的流行病学调查。目前较成功的是RT-PCR诊断技术，与血清学方法相比，具有极其敏感、特异等特点，特别是选择保守的基因片段作为目的基因，很适合实验室的快速诊断。

2 防治技术进展

2.1 疫苗及其研究进展

2.1.1 弱毒疫苗以呼吸型代表株Massachusette(M株)IBV致弱的弱毒疫苗，是50年代以来开发应用的血清型，该血清型的H52、H120和Ma5等弱毒疫苗已为绝大多数国家所采用，其次是Conn株强毒致弱的疫苗株。活疫苗能有效刺激机体的免疫系统，激发体液免疫和细胞免疫，同时使用方便，生产成本低。活疫苗的不足之处一是多株、多种弱毒疫苗株的混合使用可能因基因重组而出现新的变异毒株甚至强毒株；二是在疫苗在使用过程中可能存在毒力返强的问题。这使得致弱活毒疫苗在理论和实践上都不可能从根本上彻底控制IB的流行。

2．1．2 灭活疫苗 Gough等1977年就报道了用油乳剂灭活苗使IB得到有效控制，但是，由于IB血清型的多样性，单价灭活苗并没能阻止IBV变异株引起IB的暴发。随后，Finney(1990)等研究表明IB二价苗能刺激良好的抗体反应；王红宁等(1999)对我国IB的流行病学调查表明，Mass型占19．7％、T型占21．1％、Gray型占9．3％、Hotle型占3．9％，变异株占43．4％，提出了用不同类型多价灭活疫苗预防本病更为有效的科学依据。王红宁等(1993-2000)在国内率先研制出了多种多价油乳剂灭活苗，经区域试验证明，该疫苗对鸡安全无副作用，并能有效地预防IB。灭活疫苗的不足之处是使用剂量大，需要配合佐剂，制备比较复杂，因而成本较高。

2．1．3 基因工程苗采用核酸重组方法研制新型、高效、安全的IBV基因工程疫苗是近年来IB研究中的一个重要方面。宋延福等将IBV的主要免疫原基因Sl克隆到形成多角体的杆状病毒表达载体；黄亚东等构建了含IBVGD6株S，基因的大肠杆菌重组表达载体pET-S1。已有的研究表明，几乎所有的亚单位表达产物均出现N-糖基化不完全，S1亚单位疫苗必须经3-4次反复加强免疫方可形成确实的免疫保护，因此IB基因工程疫苗的实用化还有待进一步研究。

2．1．4 IB活载体疫苗 Binns等(1986)利用鸡痘病毒作载体研制出了IBV活载体疫苗；Tomley用Beaudette株纤突蛋白基因和痘苗病毒WR株重组，得到了能产生含有S1和S2亚基的糖基化的180KD的多肽前体的重组病毒。目前，包括我国在内，全球已有多个研究单位在致力于适合IB免疫的疫苗载体和活载体疫苗的研究。但考虑到IBV S1蛋白具有很高的突变率，因此活载体疫苗的保护范围还值得进一步研究。

2．1．5 核酸疫苗 DNA疫苗能够同时激发机体产生体液免疫和细胞免疫，在安全性和有效性上具有突出的优点。步志高等(1998)以M4：地方流行株IBVS、基因构建了DNA免疫表达质粒，并对其免疫原性进行了初步分析。结果表明，该表达质粒可同时诱导机体形成针对IBV的细胞免疫和体液免疫反应，有希望取代普遍采用的弱毒苗应用于我国ID的免疫预防。陈洪岩等(1999)、刘思国等(2001)分别选用IBV的S1基因和N基因构建核酸疫苗，结果表明质粒DNA免疫鸡攻毒后的保护率均为40％。

2．1．6 转基因植物疫苗转基因植物疫苗是Mason;于1992年提出的，该技术是利用分子生物学技术把重组的疫苗基因导人植物，并使植物能够大量表达重组蛋白的一类生物技术。由于其应用前景可观，已引起免疫学家、分子生物学家和植物学家的极大兴趣与关注。利用该技术国外至今已获得成功的有乙型肝炎表面抗原、流感病毒血凝素、艾滋病病毒抗原、口蹄疫病毒抗原等10多种疫苗。王红宁、李春等(2003)通过对RT-PCR取得IBV S1基因片段，已将其导人玉米表达载体进行表达工作。

2．2 免疫接种

2．2．1 疫苗的选择和配合对于已经有IB发生的地点，国内外主要采用疫苗接种的方法来预防IB。多数学者认为应用弱毒苗比灭活苗具有更好的免疫效果，也有学者认为弱毒疫苗株在鸡群中的周期性感染有毒力返强的潜在危险。实际生产中，由于IB的血清型众多，单一的疫苗只能对同型毒株产生保护作用，对不同型毒株往往只能产生部分保护或不保护，所以在H52、H120等弱毒疫苗免疫后，也可能发生即使抗体水平很高却因流行毒株的感染而导致发病的现象。J．K．Cook等(1984)、王秀清等(1993)通过系列试验研究证实体液免疫和细胞免疫在抵抗IBV感染中几乎占有同等重要的地位。王红宁等(1996)认为采用弱毒疫苗H120滴鼻同时与IB多价灭活苗注射相结合能有效提高呼吸道细胞免疫和抗体水平，达到良好的预防效果。

2．2．2 免疫程序王红宁等(1997)结合我国目前蛋用种鸡场IB发生的现状，经过区域试验，建议IB免疫程序如下：3-4或7-12日龄，鸡传染性支气管炎H12。滴鼻，同时用IB多价油苗注射；32-35日龄，传支H120滴鼻同时用多价油苗1头份注射；100-140日龄，商品蛋鸡用ND-IB(多价)二联苗加强免疫，种鸡用ND-IBD-IB(多价)三联苗加强免疫；220-280日龄种鸡加强免疫，用ND-IB(多价)-IBD三联苗。当IB呈暴发流行时，要采取紧急接种时选用相应血清型的多价油乳剂灭活苗紧急接种效果较好，而不宜采用毒力较强的弱毒疫苗如Hs2等。联苗免疫对于IB的预防具有重要的实际意义。由于IBV与NDV毒株在细胞培养及鸡胚培养中表现出相互干扰作用，在应用IBV和NDV弱毒活苗的联苗方面一直存在争议。王红宁等(1994)研究证实IBV与NDV弱毒活苗之间有干扰作用，而将IBV和NDV分别灭活再制成二价联苗可消除干扰作用，因此建议：在发病严重的鸡场不用lB-ND二联弱毒苗而采用IB单苗或NDV单苗与IB多价灭活单苗配合；在安全地区及对种鸡加强免疫时用IB-ND二联灭活苗或三联灭活疫苗，并研制了IB-ND二联油乳剂灭活苗以及IB-IBD-ND三联油乳剂灭活苗。

2．3 综合措施

对IB的防制主要采取疫苗接种、免疫监测、加强饲养管理、环境消毒、发病后淘汰病鸡及对症治疗等综合防制措施。加强饲养管理，给予优质全价饲料，并在饲料中添加适量维生素和矿物质，适当降低饲料中的蛋白含量；改善饲养环境，控制饲养密度，保持通风换气和适宜的温度和湿度；健全消毒制度，坚持作好预防性消毒，对鸡只实行全进全出，空场不少于14天，并对全场进行彻底清洗、消毒。IBV对常规的消毒药如来苏尔、氢氧化钠、过氧乙酸、新洁而灭、季胺盐类等均敏感。目前，还没有特效的药物可以用于IB的临床治疗，使用抗生素可以控制继发感染。汪德刚等(2000)运用中草药制剂治疗鸡肾型IB，取得了良好的效果。用中药制剂，可以加速尿酸盐的排泄并阻止其进一步生成，从而缓解症状减少鸡只的死亡。给予复方口服补液盐或碳酸氢盐，可以补充钾、钠的损失和消除肾脏炎症。由于病毒变异快，血清型多样化，给IB的诊断和预防带来很大困难，目前在禽IB的诊断和防治上有了很大的进展，并在生产中对IB的控制起到了有效的作用，但养鸡生产仍然面临着IB的巨大威胁。

怎么管好鸡苗？鸡苗怎样饲养管理？

【常见问题】怎么管好鸡苗？鸡苗怎样饲养管理？

【专家解答】鸡苗的好坏关系到后期的养殖效益，下面小编为您介绍了鸡苗的饲养管理方法：

一、合理饲养

鸡苗一般在孵出后24~26小时开食。开食后可将小米、碎玉米等饲料，撒在红色或绿色的塑料布上面，让鸡苗练习啄食，3天后再逐渐换为配合饲料。饲喂次数，一般1~45日龄每天饲喂5~6次；46日龄以后饲喂4~5次。每次不宜饲喂得太饱，要少喂勤添，以饲喂8成饱为宜。随时供给充足的清洁饮水。1~4日龄，最好饮5%的温红糖水，以利于鸡苗腹中剩余蛋黄的吸收利用。饲喂时要随时注意饲料的消耗变化，饲料消耗过多或过少，都是鸡苗患病的先兆。

二、加强保温

保持育雏室适宜的温度，是育雏成功的重要条件。鸡苗刚出壳后，身上绒毛稀少，抗寒能力极差。鸡体新陈代谢旺盛，而采食量少，而体温调节中枢尚未健全，自身所产生的热能不能维持生理热的需要。因此，育雏必须搞好人工保温工作。一般初生鸡苗，室内要保持33~35℃，以后每周降低约2~4℃。待30~40日龄后，才可停止人工保温。目前人工保温所用的热源有煤炉、保温炕、电力保温伞、保温箱、烟道、红外线等。养鸡户可根据自己的现有的实际条件而宜，确保育雏室温度适宜。

三、湿度调节

鸡苗适宜在相对湿度60~65%左右的环境条件下生活。如果育雏室湿度过大，可勤换垫料，不让饮水打湿垫草，同时还可以通过加强室内通风，来降低湿度；如果湿度过小，可在热源上烧水，或在人行道上撒水增湿。

四、合理光照

在鸡苗1~2日龄，可采用24小时全天候光照，使鸡苗熟悉环境，以便于吃食、饮水。但照明灯光不宜过亮，一般以每20平方米安装1盏25W电灯泡为宜。至3~14日龄，只夜间喂食时开灯即可，白天不必开灯，以便于鸡苗休息以促进生长发育。2周龄后，如果天气温暖晴好，可降鸡苗放到室外去活动。但开始时活动时间不宜过长，一般以半小时左右为宜。以后活动时间可逐渐延长，使鸡苗的到充足的阳光和充分的运动，以增强鸡体的抗病能力。

五、饲养密度

育雏室的饲养密度不宜过大，一般以每平方米面积饲养1~7日龄的鸡苗20只左右为宜。以后随着日龄的增大，逐渐减少饲养只数。育雏室内如果饲养密度过大，不但容易造成鸡苗生长发育不良，发病率提高，而且还会增高死亡率和残次率，从而降低饲养效益。

六、通风换气

育雏室应特别注意通分换气。1只鸡苗一分钟要呼吸50次以上，呼入氧气呼出二氧化碳气体。同时，鸡粪中还不停的释放出氨气。如果育雏室不及时排除这些有害气体，换进新鲜的空气，就会导致鸡苗生长发育不良，感染呼吸道疾病、瞎眼等。育雏室通风换气与保温是一对矛盾，解决这一矛盾的有效办法就是：

1、窗户不安玻璃，钉白纱布或塑料布，随时起钉，让室内进行间断的通风换气，即可通风，又可保温。

2、在每天中午气温高时，进行开窗通风换气。

七、保持环境安静

鸡苗非常胆小怯弱，对周围环境的微小变化，都非常敏感。外界的任何干扰都会鸡苗严重的惊群，致使鸡苗互相挤压而引起死亡。因此，育雏室要注意保持环境安静，防治猫狗等进入惊扰；拒绝参观。因为参观不仅惊扰鸡苗休息，而且还会传染疾病。

八、搞好防疫

鸡苗常患的疾病主要有：白痢、球虫病和新城疫（即鸡瘟）。预防这些疾病，除了保持育雏室清洁卫生，室内外用具和饲饮用具天天清洗消毒外，还要对症进行药物防治：

1、鸡白痢：预防鸡白痢，可在鸡苗1~20日龄时，在饲料内添加.03%的土霉素或合霉素。

2、球虫病：预防球虫病，可于鸡苗21日龄开始，在饲料里添加0.04%的痢特灵，喂3天，停2天，反复饲喂到15~45天。

3、新城疫（即鸡瘟）：预防新城疫，可在鸡苗15日龄时，用鸡新城疫Ⅱ系弱毒苗滴鼻。

【小编结语】加强保温是雏鸡饲养的关键要点，上文小编为您介绍了鸡苗饲养管理的一些技术要点和注意事项，希望本文对您有所帮助，感谢您的支持。

怎么配制鸡苗饲料？鸡苗饲料的配制方法

鸡出壳后不到一天就可以喂料了，不过鸡苗喂养要十分小心仔细，这里小编为您介绍鸡苗出壳后怎么喂料，鸡苗饲料如何配制等问题，有养鸡的朋友可以参考一下。

1、一般鸡出壳1524小时以后就可以喂料了，先把大米煮成八分熟，再用清水淘洗，使米呈沙粒状，这样便可以喂给鸡了。

2、喂料前可先用0.01％的高锰酸钾水给鸡饮服，也可将其拌入饲料中喂鸡。45天后，鸡的日粮可改为配合料。可以买鸡苗全价颗粒料直接饲喂，也可按照各种饲料所含养分和适口性多样配合。常用鸡苗配合饲料配方为：玉米40％、高粱5％、黄豆15％、麦麸15％、豆饼10％、菜子饼8％、鱼粉5％、骨粉1.5％、食盐0.5％。其中蛋白质是鸡苗生长发育必不可少的营养物质。

3、鸡苗越小对蛋白质的需要量越大，所以如果有条件应该喂一些小鱼、蚯蚓等，作为鸡苗鸡性蛋白质饲料的补充。此外，鸡苗对维生素的需要量也很大，从鸡苗开食的第3天就可以在饲料中拌入一些切碎的鲜嫩青饲料；10日龄以后的饲料中还应掺一些干净的小砂子以帮助消化。

4、在喂料上应坚持少喂勤添、少吃多餐和吃八成饱的原则。日喂次数一般315日龄时喂78次；1630日龄为67次，3160日龄为56次。

5、饮水对鸡苗也很重要，应在开食的同时经常供给适量清洁饮水，20日龄以前的鸡苗最好饮温水。

鸡苗质量检验标准|判断鸡苗质量好坏的方法

你知道鸡苗质量检验标准是什么吗？如何判断鸡苗质量好坏呢？鸡苗质量的好坏关系到雏鸡成活率的高低，同时也将影响养鸡场成鸡品种的优劣，从而阻碍养殖户创造可观养殖效益，下面小编就给大家介绍一下判断鸡苗质量好坏的方法。

一、鸡苗质量检验标准

1、鸡苗的外表和精神状态

无畸形，无眼盲,鹦鹉喙,上下喙弯曲,无肛门等生理缺陷，脐部干净：无黑线、开孔、露脏器； 2、眼睛和叫声

眼睛明亮、活泼、腿脚光亮、握在手中挣扎有力，听鸡苗的叫声，叫声要清脆而洪亮。

3、雏鸡的体重

雏鸡的体重都应在35克以上，平均体重在42克以上。前期体重越大，后期体重也越大； 4、看卵黄吸收情况

颜色越深说明卵黄吸收越好，并无蛋壳粘连、稀毛。如有个别鸡腹部膨大，脐部没有绒毛，脐带未断掉，有血水，肛门带有白色石灰样粪便，均可判为不健康鸡苗。

5.出壳正常

选择出壳时间正常、集中、整齐的雏鸡，出壳过早或过迟是因种蛋质量差或孵化温度不当所致，饲养难度大；

二、判断鸡苗质量好坏的方法

一般对初生鸡雏的选择，可根据以下表现进行：对于瞎、瘫、残、畸形雏及过小、过弱的雏鸡均应剔出淘汰。根据各品种的特征，按要求严格选择。

有经验的育雏人员，主要根据雏鸡的出壳时间和按照鸡的有膘、有毛、有骨气的长相，通过一看、二摸、三听的方法，就可大致鉴别雏鸡的强弱和优劣。经过选择的雏鸡，就按强弱分群养育。每群以300只~500只为宜，一般不超过1000只，雏群过大容易互相踩踏损伤。有条件的养鸡场，在雏鸡出壳毛干后，就进行雌雄鉴别，再按公母分群养育。这样，就可克服强欺弱、大欺小、公欺母的现象，还能根据各鸡群的不同情况，饲喂所需要的日粮，也便于管理工作中的区别对待，从而为培养发育整齐的健康鸡群打下良好的基础。初生雏鸡虽然经过选择和分群养育，但在以后还会出现强弱和大小不同的个体，所以在育雏及育成期间，还需进行鉴别和分群工作，随时将弱小个体挑出单独养育。

首先就是看它的外在了，看它是否外观有活力，一般是活泼多动的，没有伤残，在就是看出它的反应很灵敏，健康好动，眼睛转动灵活的。第二就是看它的外在的绒毛。绒毛长的均匀丰盈的具有光泽，干净的一般是健康的幼鸡苗。第三，就是看你握住它时它是否进行挣扎，它的腹部大小是否适中是否有弹性。第四，就是看鸡苗的卵黄的吸收吸收情况，愈合好的，干燥。第五，是看土杂鸡的出壳重一般是在30以上，同一个种类的鸡苗大小一般均匀。

以上就是小编为大家整理的鸡苗质量检验标准鸡判断鸡苗质量好坏方法的相关内容，鸡苗质量的优劣十分关键，科学正确挑选鸡苗是雏鸡成活率的保障，也可以有利降低养殖户养鸡风险，从而增大养鸡成功几率。

鸡苗怎么养？鸡苗疾病怎样防治？

坚信大伙儿在农村常有饲养过鸡苗，针对技术专业的养殖场而言，鸡苗是十分难养好的，稍不留神，马上会出現雏鸡身亡，导致经济发展上的损害，养好啦，就可以让农民得到高些的经济收益，那麼鸡苗该怎么养？鸡苗病症怎样预防？接下去一起去看一下吧！

一、鸡苗怎么养？

1、温度湿度操纵

鸡雏的情况下一定要留意操纵好温度湿度，谨记鸡雏室的溫度时高时低，一般不一样环节鸡苗的耐高温工作能力不一样，假如出現温度湿度难题，马上会导致鸡苗脱干和消化道疾病的产生，一般3日龄的鸡苗，合适在34~36℃的自然环境中鸡雏，环境湿度操纵在65%~70%上下就可以，后边伴随着鸡苗生长发育時间的提高，温度湿度能够慢慢减少。

2、饮水和上料

由于鸡苗身体也有一些未消化吸收完的卵黄，给鸡苗立即饮水可以推动卵黄的消化吸收，协助鸡苗消化吸收的另外，可以提升鸡苗的抵抗能力，此外，在饮水中能够添加适度的果糖和水溶维他命，并维持饮水的整洁性，提升鸡苗的抗病性工作能力，上料要少喂勤添，并确保雏鸡一次吃了料，防止导致奢侈浪费。

3、光照和饲养相对密度

鸡苗的进食、健身运动、饮水和光照、饲养相对密度有挺大关联，不科学的光照和饲养相对密度会造成鸡苗神经大条，吃胃口降低，危害鸡苗身心健康，饲养相对密度不匀称，会造成鸡苗生长发育大小不一，非常容易生病，因此光照和饲养相对密度的掌握也十分关键。

二、鸡苗病症怎样预防？

鸡苗的抵抗能力低，易感柒病症，非常鸡苗在微信大群饲养下产生新城疫、感染性法氏囊炎、马立克氏病、感染性急性支气管炎等肺炎疫情，一旦病发，一般全是集体性的，以便抑止肺炎疫情扩散，就必须搞好肺炎疫情的防止，一般在雏鸡的1日龄用鸡马立克氏病病疫苗对雏鸡开展打针打疫苗。在雏鸡的2~5日龄用雏鸡用张口药对雏鸡开展饮水，以利于雏鸡沙门氏菌病的清洁。用禽流感病毒油苗对雏鸡开展打针打疫苗，可以防止新城疫和感染性急性支气管炎，针对22~25日龄的鸡苗用一些抗菌素药物对鸡开展呼吸系统疾病的预防。

综上所述，有关鸡苗怎么养的详细介绍就到这儿了，假如大伙儿要想管理鸡苗，饲养的每一关键点，常有将会对鸡苗造成危害，特别是在要留意鸡苗病症的预防，那样才可以让鸡苗饲养事倍功半。

怎样做好鸡苗的管理？鸡苗管理方法介绍

鸡苗指的是刚出生不久的小鸡仔，对于养鸡来说，鸡苗质量的好坏对于养鸡的效果具有很大的影响。在养鸡的过程中，常常会因为鸡苗的原因而造成各种意外事件。因此，对于养鸡户来说，做好鸡苗的管理就显得十分重要。那么，应该怎样做好鸡苗的管理呢？鸡苗的管理技术有哪些呢？下面我们就来了解一下吧。

鸡苗的好坏关系到以后产蛋的高峰，所以前期的鸡苗育雏尤为重要。