本病是一种常见的病母性传染病,引起鸡的所有器官,组织生成肿瘤。本病传染性强,埋伏期较长,13月不等。爆发急性内脏型鸡马立克氏病的鸡淘汰及死亡率达10一80%,严重威胁养鸡生产。马立克病对初生雏鸡最易感染。困此,育雏室的隔离、流水线、净化特别重要,是预防马立克病的第一重要环节,因为初生雏鸡刚接种的马立克疫苗还没有产生免疫效果。肉鸡多在40一60日龄发病,蛋鸡可在70一140日龄发病,最早可见4周龄发病。不同型马立病症状如干:
急性内脏型型马立克病:精神萎靡消瘦。剖检可见肝、脾、肾等器官上面均有黄白色的肿瘤,有的突出于器官外表,有的是弥漫性的散布在器官内呈肿瘤样变。
神经型:典范的神经型马立克病的鸡一只脚朝前,一只脚朝后,呈劈叉状。脚部神经增粗。
皮肤型:病鸡的腿部、颈部、翅膀等的皮肤上形成大小不等的肿瘤结节,呈灰粉黄色,突出于皮肤外表,有时破溃。
预防马立克病,一是搞好环境卫生消毒,特别是雏鸡舍。二是一日龄雏鸡接种马立克防毒苗。多在三周内产生免疫力,免疫期达一年,所以雏鸡30日龄内的管理、隔离更显重要。
病原:
鸡马立克氏病的病原是鸡疱疹病毒,病之特征是以淋巴细胞浸润和肿瘤形成。
流行特点:
本病主要感染鸡和火鸡。日龄越小易感性越高,
1日龄雏鸡比10日龄以上雏鸡易感性高几百倍,蛋鸡大多在2-5月龄发病。本病主要传播途径是呼吸道。病鸡在其羽毛囊上皮细胞内复制病毒并可长期向外排毒,病毒随着皮屑和脱落的羽毛污染空气,饲料及周边环境,在较长时间内具有传染性,通过空气传播本病。本病不能经卵垂直传播。发病率一般为5%-60%,死亡率10-50%。
鸡马立克氏病的症状:
根据肿瘤发生的部位和症状,可分为四种症状类型:
(1)神经型:病鸡运动失调,腿麻痹,不能行走,呈一腿向前一腿向后的劈叉姿势,半瘫或全瘫。
(2)内脏型:病鸡精神沉郁,食欲减退,腹泻,羽毛松乱,迅速消瘦。
(3)眼型:虹膜由黄色退成灰色,甚至浑浊。瞳孔边缘不整齐。瞳孔缩小,严重时瞳孔仅留下一个针头大小的孔,造成失明。
(4)皮肤型:在颈部和翅内等部毛囊肿大呈结节状。皮肤增厚,毛囊周围有出血斑点并呈肿瘤状。
病变:
内脏型马立克氏病鸡,解剖可见肝、脾显著肿大,表面有白色肿瘤结节,腺胃肿大;神经型多见坐骨神经肿胀、出血或胶样浸润。
诊断:
根据鸡马立克氏病的症状和病变特征可作初步诊断,用琼脂扩散试验确诊本病。
防治方法:
防止雏鸡马立克氏病毒早期感染:
日龄越小对本病的易感性越大,因此,防止雏鸡早期感染至关重要。为此,要做好孵化前种蛋,孵化器,腐化室的消毒;对育雏室,鸡笼及其用具也应彻底消毒。雏鸡出壳后24小时内用马立克氏病弱毒疫苗接种。疫苗接种后的3周内实行严格的隔离饲养,可有效地防制本病的发生。不同日龄的鸡不能混群饲养,实行全进全出饲养制度。
目前马立克氏病疫苗有血清Ⅰ型疫苗,血清Ⅱ型疫苗,血清Ⅲ型疫苗和多价疫苗。血清Ⅲ型疫苗为火鸡疱疹病毒疫苗,它是目前国内外使用最广泛的疫苗。如果经火鸡疱疹病毒疫苗接种无效时,使用多价苗可获得良好的效果。
鸡马立克氏病(MD)是由马立克病疱疹病毒引起的一种传染病,以淋巴细胞增生和肿瘤形成为特征,引起肢(翅)麻痹,以及性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤肿瘤病灶。在鸡的疾病中,马立克氏病是危害最大的疾病之一,鸡群受到感染后,陆续患病,引起大批死亡,常常给养鸡业带来巨大的经济损失。应用琼脂扩散反应检查血清抗体,成为马立克氏病特异性诊断及流行病学调查的一种重要血清学方法。国内外用琼脂扩散试验检疫马立克氏病,实际应用表明该法简便易行,基层兽医单位、鸡场及养鸡专业户均可采用,是一种较为理想的诊断检疫马立克氏病的血清学方法。大家一起来了解一下:
1、试验材料
试验用品:塑料采血管、三棱针、打孔器、滴管、平皿、玻璃棒、烧杯、镊子、剪子、酒精灯和带盖瓷盘、琼脂及含8%氯化钠、pH7.2~7.4的磷酸盐缓冲液等。
鸡马立克氏病羽囊抗原的制备:将病鸡皮肤呈现红肿感染处的羽毛从贴近皮肤处剪掉,剪下带有羽囊的皮肤,称重,加入二倍量的pH7.2的磷酸缓冲盐水研磨。-20℃冰结后,再经37℃融化,反复冰融4次。25000r/min离心15min,上清液加入0.01%硫柳汞防腐。置低温保存备用,马立克氏病羽囊抗原也可向生物药厂购买。
鸡马立克氏病阳性血清的制备:用已知标准马立克氏病羽囊抗原或通过剖检和组织检查确诊为马立克氏病病鸡群,自病鸡拔下新羽毛若干、剪下羽囊,约5mm长为抗原。由病鸡群挑选慢性病鸡或康复鸡采取血清。与羽囊抗原作琼脂扩散试验,如出现清晰沉淀线,则为马立克氏病阳性血清,采血分离血清,加0.01%硫柳汞防腐、冰结或4℃保存备用。马立克氏病阳性血清也可向生物药厂购买。
2、操作
琼脂板的制备。用含有8%氯化钠的磷酸缓冲液配制的1%的琼脂溶液加热溶化后倒入平皿中,制成2~3mm厚的琼脂板,平置室温凝固。
打孔。用打孔器(直径2~3mm金属小管)按座标纸上面好的七孔图案,照图案固定位置打7个孔,中央打1个孔,孔径为3mm,外围打6个孔,孔径为2mm,孔与孔的距离为3~4mm,如直接以羽囊作试验,则无须打抗原孔。
抗原及血清的添加。用标准抗原检测未知抗体(被检鸡血清):①用带胶乳头滴管将受检血清顺序逐个滴加于外周2、3、5、6孔内,加入阳性血清于1、4孔内,每加1份受检血清前,必须把吸管充分洗净拭干。②在外围孔滴加受检血清完毕后,用另一滴管向中央孔滴加标准抗原,抗原和血清的加入量以加满不溢出为度。③加样完毕平板加盖,在室温静止片刻,待加样稍吸附下沉后平放在铺有数层湿纱布的带盏瓷盘中,置37℃条件下,进行反应,逐日观察3天,并记录结果。测定抗体效价时,可倍比稀释血清,以出现沉淀带的血清最大稀释度为抗体效价。
用已知马立克氏病阳性血清检测未知抗原(被检鸡的羽囊):①羽囊琼脂扩散试验,用镊子镊取羽囊(约5mm)。尖端向下,插入抗原孔的位置上,一处一根,一只鸡用6根;中央孔滴加已知阳性血清。②孔囊浸液琼脂扩散试验:选拔受检鸡含羽囊丰满的羽毛10根以上,将带有羽髓的毛根剪集于三分管内,每管加入0.5mL磷酸缓冲盐水,用玻璃棒将羽毛根压集于管底,以适当压力转动玻璃棒10多次,待浸提液混浊后,用吸管将其移入外周孔内,一个检样滴一个孔,中央孔滴加已知阳性血清。
3、判定
阳性:如果受检血清内含有马立克氏病特异抗体或受检羽髓内含有马立克氏病特异抗原,则抗原和抗体孔之间或血清孔与羽囊之间出现一条清晰致密沉淀线,即为阳性,在羽囊琼脂扩散试验中,一只鸡的6根羽囊如有一根出现沉淀线,即判为阳性在羽囊琼脂扩散。阴性:当抗原和抗体孔之间或血清与羽囊之间不形成沉淀线者,则判为阴性。
被检材料可能会出现两条以上的沉淀线,其中一条与已知抗原和阳性血清的沉淀线融合者判定为阳性。当抗原存在多种成分时,将呈现多条沉淀线以至交叉反应线,因此可用来检查抗原和免疫血清的特异性、纯度和浓度,比较抗原之间的异同点,因而应用范围比较广。
4、注意事项
对剪集的雏鸡羽髓根或羽髓含量较少的羽根,需加少量磷酸缓冲盐水浸提。水量不宜过多,以防由于稀释而影响反应结果。
在滴加已知材料或未知材料时,注意不要产生气泡,均以加至平满为宜;过少则降低反应效果;过多则易出现加样连片。
反应时间要适宜,时间过长,沉淀线可解离而导致出现假阴性,甚至不出现或不清楚。琼脂板孔打毕后,将琼脂板底面在酒精灯上稍微加热封底。
在处理和滴加每份受检样品前,必须将玻璃棒和滴管彻底冲洗拭干。每次加完不同样品后要更换枪头,以免造成污染。处理或使用过的受校样品可放在普通冰箱内,以备必要时复检用,待判定结果无误时废弃。马立克氏病抗原和血清等诊断试剂需低温保存,以防降低效价。
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